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品牌	SOLARBIO/索萊寶	CAS	詳詢
分子式	詳詢	純度	詳詢
分子量	詳詢	貨號	BC0130
規格	50T/24S	供貨周期	現貨
主要用途	蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的關鍵酶之一,能夠水解蔗糖變	應用領域	環保,化工,生物產業,農林牧漁,綜合

植物蔗糖酶活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號: BC0130
規格: 50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規格	保存條件
提取液	液體30 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體4 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體7 mL×1瓶	常溫保存
標準品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：用時加入2.5 mL 蒸餾水充分溶解；用不完的試劑2-8℃可保存一周；
標準品：用時加入1 mL蒸餾水充分溶解，制備10 mg/mL葡萄糖標準溶液待用；用不完的試劑2-8℃保存一周。

產品說明：
蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的關鍵酶之一，能夠水解蔗糖變成相應的單糖而被機體吸收。
本試劑盒采用3,5-二硝基水楊酸法測定蔗糖酶催化產生的還原糖的含量，由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3,5-二硝基水楊酸與還原糖共熱被還原成棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內還原糖的量和反應液的顏色深度成正比。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、恒溫水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
二、測定步驟
1、分光光度計預熱30min以上，調節波長至540nm，蒸餾水調零。
2、標準品的制備：
將標準品用蒸餾水稀釋至1.5、1、0.8、0.6、0.4、0.2、0mg/mL（0mg/mL為空白管）。
3、加樣表：

試劑名稱（μL）	對照管	測定管	標準管
試劑一	50	50	50
蒸餾水	50	-	-
樣本	100	100	-
標準品	-	-	100
試劑二	-	50	50
置于25℃準確水浴10min
試劑三	100	100	100
混勻，100℃水浴10min 左右（蓋緊，防止水分散失），冷卻至室溫
蒸餾水	700	700	700

混勻，于540nm下測定各管吸光值，ΔA=A測定管-A對照管。（每個測定管需設一個對照管）

注意事項：
當A大于0.9時，建議將樣本用提取液稀釋后進行測定。
參考文獻：

Karley A J, Ashford D A, Minto L M, et al. The significance of gut sucrase activity for osmoregulation in the pea aphid, Acyrthosiphon pisum[J]. Journal of insect physiology, 2005, 51(12): 1313-1319.

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