中性木聚糖酶活性檢測試劑盒 糖代謝

中性木聚糖酶（NEX）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2590
規格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
標準品：10mg木糖。臨用前加入667μL蒸餾水配成100μmol/mL的標準品溶液，2-8℃保存8周。
產品說明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業中的原料細胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進有效物質的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進營養物質的吸收利用，因而廣泛的應用于釀造和飼料工業中，中性木聚糖酶（NEX）一般分離自最適生長pH為6-8的微生物。
NEX在中性環境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下進一步與3,5-二硝基水楊酸發生顯色反應，在540nm處有特征吸收峰，反應液顏色的深淺與酶解產生的還原糖量成正比，通過測定反應液在540nm吸光值增加速率，可計算NEX活力。


注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
低溫離心機、可見分光光度計、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
吸光度變化應該控制在0.01~1.2之間，否則加大樣本量或稀釋樣本，注意同步修改計算公式中的稀釋倍數。實驗實例：

1. 取0.1193g藍莓加入1mL緩沖液進行勻漿研磨，取上清用蒸餾水稀釋40倍后按照測定步驟操作，用比色皿測得ΔA測定=A測定- A對照=0.497-0.458=0.039，帶入標曲y=0.32x-0.1474（R²=0.9982），計算x=0.5825，按樣本質量計算NEX活性得：

NEX活力（U/g 質量）= x÷W÷30×F =0.5825÷0.1193÷30×40=6.510 U/g 質量。

1. 取泡菜汁離心取上清用蒸餾水稀釋2倍后按照測定步驟操作，用比色皿測得ΔA測定=A測定-A對照=0.474 -0.081=0.393，帶入標曲y=0.32x-0.1474（R²=0.9982），計算x=1.689，按發酵液計算NEX活力得：

BAX活力（U/mL）= x÷T×F =1.689÷30×2=0.113U/mL。
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