酸性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒 糖代謝

酸性木聚糖酶（ACX）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
可見(jiàn)分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
貨號(hào)：BC2600
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
1、標(biāo)準(zhǔn)品：10mg木糖。臨用前加入667μL緩沖液配成100μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，2-8℃保存8周。
產(chǎn)品說(shuō)明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中，酸性木聚糖（ACX）一般分離自耐酸的真菌，細(xì)菌及部分霉菌。
ACX在酸性環(huán)境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，進(jìn)一步在沸水浴條件下與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng)，在540nm處有特征吸收峰，反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率，可計(jì)算ACX活力。


注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、可調(diào)式移液槍、冰、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：
吸光度變化應(yīng)該控制在0.01~1.2之間，否則加大樣本量或稀釋樣本，注意同步修改計(jì)算公式中的稀釋倍數(shù)。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1079g藍(lán)莓加入1mL緩沖液進(jìn)行勻漿研磨，取上清用蒸餾水稀釋40倍后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得ΔA測(cè)定=A測(cè)定- A對(duì)照=0.717-0.581=0.136，帶入標(biāo)曲y=0.413x-0.0233（R²=0.9993），計(jì)算x=0.386，按樣本質(zhì)量計(jì)算ACX活性得：

ACX活力（U/g 質(zhì)量）= x÷W÷30×F =0.386÷0.1079÷30×40=4.770 U/g 質(zhì)量。

1. 取泡菜汁離心取上清按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得ΔA測(cè)定=A測(cè)定- A對(duì)照=0.639-0.392=0.247，帶入標(biāo)曲y=0.413x-0.0233（R²=0.9993），計(jì)算x=0.654，按發(fā)酵液計(jì)算ACX活力得：

ACX活力（U/mL）= x÷T×F =0.654÷30×1=0.022U/mL。
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