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          • 植物根系活力(萘胺法)檢測試劑盒 其它
          產品名稱:

          植物根系活力(萘胺法)檢測試劑盒 其它

          產品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
          廠商性質: 生產廠家 產品時間: 2024-04-19
          植物根系活力(萘胺法)檢測試劑盒 其它
          有效期
          6個月
          儲存條件
          2-8℃
          單位

          英文名稱
          Plant Root Vitality (Naphthylamine-Method) Assay Kit
          檢測方法
          可見分光光度法 Spectrophotometer
          規格
          50T/48S

          產品概述

          品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
          分子式詳詢純度詳詢
          分子量詳詢貨號BC5290
          規格50T/48S供貨周期現貨
          主要用途植物根系活力(萘胺法)檢測應用領域環保,化工,生物產業,農林牧漁,綜合

          植物根系活力檢測試劑盒(萘胺法)說明書

          可見分光光度法

          注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。

          貨號:BC5290

          規格:50T/48S

          產品內容:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

          試劑名稱

          規格

          保存條件

          試劑一

          液體20 mL×1

          2-8℃保存

          試劑二

          液體100 mL×3

          2-8℃保存

          試劑三

          液體5.5 mL×1

          2-8℃保存

          試劑四

          液體55 mL×1

          2-8℃保存

          標準品

          液體5 mL×1

          2-8℃保存

          溶液的配制:

          1、 試劑三:臨用前加入49.5 mL蒸餾水,充分混勻,現用現配。未用完的試劑2-8℃可以保存4周。

          2、 標準品:0.2 mg/mL α-萘胺標準品。

          產品說明:

          根系是植物吸收水分和礦質營養的主要器官,同時又是植物體中如氨基酸、激素等重要物質合成、同化、轉化的器官,因此根的生長情況和活動能力直接影響植物個體的生長情況、營養水平和產量水平,測定根系活力具有重要的實際意義。

          植物根系能氧化吸附在根表面的α-萘胺,生成紅色的α-羥基-1-萘胺,沉淀于有氧化力的根的表面,使這部分染成紅色。α-萘胺在酸性條件下于對氨基苯磺酸鈉和亞硝酸鹽作用生成紅色的偶氮染料。根系活力可以通過α-萘胺減少量來表示。

          NO2-+Sodium P-aminobenzenesulfonate+α-Naphthylamine                       Azo Compounds520nm)  

          注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

          需自備的儀器和用品:

          可見分光光度計、水浴鍋/恒溫培養箱、可調式移液器、濾紙、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

          操作步驟:

          一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)

          樣本的制備:將根部組織洗凈,去除根上的泥土,輕輕擦干,不要過分擠壓破壞根系細胞。稱取0.5g10mL EP 管中。

          二、測定步驟

          1、 可見分光光度計預熱30min以上,調節波長至520nm,蒸餾水調零。

          2、 標準品的稀釋:將0.2mg/mL α-萘胺標準品用試劑一稀釋為0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.006250.0031250.0015625、0mg/mL的標準品(0mg/mL記為標準空白管)。

          3、 標準稀釋表:

          序號

          稀釋前濃度(mg/mL

          標準品體積(µL

          試劑一體積(µL

          稀釋后濃度(mg/mL

          1

          0.2

          500

          -

          0.2

          2

          0.2

          500

          500

          0.1

          3

          0.1

          500

          500

          0.05

          4

          0.05

          500

          500

          0.025

          5

          0.025

          500

          500

          0.0125

          6

          0.0125

          500

          500

          0.00625

          7

          0.00625

          500

          500

          0.003125

          8

          0.003125

          500

          500

          0.0015625

          9

          -

          0

          500

          0(標準空白管)

          備注:下述實驗中每個標準管需400µL標準品(注意不要在此步驟直接檢測標準品吸光值)。

          4、在10mL EP管按下表步驟加樣:

          試劑名稱(μL

          測定管

          空白管

          標準管

          0.5g

          -

          -

          試劑二

          5000

          5000

          -

          37℃避光反應,在反應10min3h 10min測定管和空白管需要各吸取400μL反應液進行下述第二步反應。

          第二步反應需要按下表在新的1.5mL EP管中加入試劑三和試劑四,再吸取400μL上述第一步反應液EP。

          注:需要先加試劑三和試劑四,再加第一步反應液,一定不能顛倒順序!

          -

          試劑三

          400

          400

          400

          試劑四

          400

          400

          400

          第一步反應液

          400

          400

          -

          標準品

          -

          -

          400

          充分混勻,常溫反應20min,取1mL1mL玻璃比色皿中,測定在520nm處的吸光度,顯色后需要在20min內完成檢測。10min所對應的吸光值記作A13h10min所對應的吸光值記作A2。計算?A測定=A1測定-A2測定,?A空白=A1空白-A2空白?A =?A測定-?A空白,?A=A標準-A標準空白管。(標準曲線和空白管只需做1-2次)

          三、根系活力計算

          1. 標準曲線的繪制

          根據標準管的濃度(x,mg/mL)和吸光度ΔA標(y,ΔA標),建立標準曲線。根據標準曲線,將ΔAy,?A)帶入公式計算樣本濃度(xmg/mL

          2. 按照樣本質量計算:以氧化的α-萘胺的量來表示根系活力

          根系活力[ μg / (g·h) ]=x×V試劑二×103÷(W×T)=1666.67×x÷W

          103:單位換算,1mg/mL=103μg /mL;V試劑二:試劑二的體積,5mL;W:根系質量,g;T:反應時間,3h。

          注意事項:

          1、 EP管內加入試劑三、試劑四以及樣本的順序不可改變。

          2、 ?A結果不在標準曲線范圍內,可以減少樣本質量(或者減少第一步反應時間)或者增加樣本質量(或者增加第一步反應時間)。

          3、 顯色后需要在20min內完成檢測

          實驗實例:

          1、 稱取0.5011g豆芽的根部,洗凈,擦干,按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算?A測定=A1測定-A2測定=1.182-1.06=0.122?A空白=A1空白-A2空白=1.217-1.175=0.042,?A =?A測定-?A空白=0.122-0.042=0.080,標準曲線為y=4.7754x+0.0047,計算得x=0.016mg/mL,帶入公式計算:

          根系活力[ μg / (g·h) ] =1666.67×x÷W =53.216 μg / (g·h)

          2、 稱取0.5007g景天的根部,洗凈,擦干,按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算?測定=A1測定-A2測定=1.171-1.012=0.159?空白=A1空白-A2空白=1.217-1.175=0.042,?A =?A測定-?A空白=0.159-0.042=0.117,標準曲線為y=4.7754x+0.0047,計算得x=0.023mg/mL,帶入公式計算:

          根系活力[ μg / (g·h) ] = 1666.67×x÷W =76.560 μg / (g·h)

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