土壤硝酸還原酶(S-NR)活性檢測試劑盒

土壤硝酸還原酶（S-NR）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC3105
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、恒溫培養箱/水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、30-50目篩、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干，過30~50目篩。
二、測定步驟

1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長至520nm，分光光度計用蒸餾水調零。

2. NaNO₂標準液的配制：用蒸餾水將標準品稀釋1、0.8、0.6、0.4、0.2μmol/mL。

3. 標準品稀釋表：

備注：實驗中每個標準管需50µL標準溶液。

1. 樣本測定：

混勻，顯色20min后，取200μL至微量玻璃比色皿/96孔板，520nm下讀取各管吸光值，分別記為A測定、A對照、A標準、A空白。計算ΔA測定=A測定- A對照，ΔA標準=A標準-A空白。每個測定管需設一個對照管。標準曲線和空白管只需檢測1-2次。
三、S-NR活性計算
1、標準曲線繪制：
以1、0.8、0.6、0.4、0.2μmol/mL標準溶液為橫坐標（x軸），ΔA標準為縱坐標（y軸）繪制標準曲線，得到線性回歸方程y=kx+b，將ΔA測定代入方程得到x（μmol/mL）。
2、S-NR活性計算：

單位的定義：每g土樣每天中產生1μmol NO₂ˉ的量為一個S-NR活力單位。
S-NR（U/g 質量）=x×V標準÷W÷T=0.05x÷W
V標準：反應體系中加入的標準液體積，0.05mL；W：風干土樣，g；T：反應時間，1d。
注意事項：

1. 試劑一、試劑二和試劑四在冰上放置，用不完的試劑-20℃分裝保存，避免反復凍融。

2. ΔA測定過?。ㄐ∮?span style="font-family:Times New Roman, Times, serif">0.01），可延長反應時間（37℃水浴時間）。

3. 當ΔA大于1時，可以將上清液用蒸餾水稀釋后，再進行測定，計算公式中乘以稀釋倍數。

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