蛋白質電泳試劑4×蛋白上樣緩沖液（含DTT）

蛋白質電泳試劑4×蛋白上樣緩沖液（含DTT）
貨號： P1015
規格： 10ml
保存： -20℃保存，建議分裝凍存，避免反復凍融，自發貨之日起少 12 個月有效。

產品簡介：
    本產品適用于 SDS-PAGE(SDS-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時作蛋白質上樣用。其主要成份為 SDS，DTT，溴酚藍，緩沖鹽溶液等。SDS 可與蛋白質結合使蛋白質-SDS 復合物上帶有大量的負電荷，這時蛋白質本身的電荷*被 SDS 掩蓋，消除了各種蛋白質本身電荷的差異；SDS 還可以斷開分子內和分子間的氫鍵，破壞蛋白質分子的二級和三級結構。DTT 可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質結構，消除了蛋白結構之間的差異。終無電荷及結構上差異的蛋白（亞單位），電泳速度只是與其分子量大小有關。溴酚藍用作電泳時的指示劑，可大概指示電泳結束的時間。

    聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯劑N,N-甲叉雙丙烯酰胺在加速劑N，N，N，N—四甲基乙二胺(簡稱TEMED)和催化劑過硫酸銨(簡稱AP)或核黃素(即vitamin B2)的作用下聚合交聯成三維網狀結構的凝膠，以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳
(polyacrylamide gel electrophoresis，簡稱PAGE)
    SDS－PAGE是在要電泳的樣品中加入含有SDS和β-巰基乙醇(或者DTT)的樣品處理液，SDS可以斷開分子內和分子間的氫鍵，破壞蛋白質分子的二級和三級結構，β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質的四級結構。SDS還與蛋白質結合使蛋白質－SDS復合物上帶有大量的負電荷，這時各種蛋白質分子本身的電荷*被SDS掩蓋。這樣電泳時，就消除了各種蛋白質本身電荷及結構上的差異，電泳速度只是與蛋白質分子量有關。用本法測定蛋白質的分子量只需根據待測蛋白質在已知分子量的標準蛋白質圖中的位置，就能得知分子量。

使用說明：
    1、請按每 30 微升蛋白樣品加入 10 微升上樣緩沖液的比例(4 倍稀釋)來使用。如果蛋白濃度過高，可用雙蒸水稀釋。
    2、混勻后，100℃水浴加熱 5-10 分鐘，使蛋白變性。
    3、冷卻室溫后，10000-14000rpm 離心 2-5 分鐘，取上清直接上樣電泳即可。
 

注意事項：
    1、聚丙烯酰胺凝膠濃度為 8%時溴酚藍指示條帶的位置大概在 30kd 左右， 膠濃度為 12%時，約在 20kd左右，膠濃度為 15%時，大概在 10kd。請根據自己目標條帶來判斷結果電泳時間。
    2、本試劑因含 DTT，有一定的毒性，為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
 
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參考文獻：
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《Lysophosphatidic acid induces the migration and invasion of SGC-7901 gastric cancer cells through the LPA2 and Notch signaling pathways》 作者:Zhiheng Ren, Chenli Zhang, Linna Ma ,Xiao Zhang ,Shuxia Shi ,Deng Tang, Jinyu Xu ,Yan Hu ,Binsheng Wang ,Fangfang Zhang , Xu Zhang, Haixue Zheng 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:31115486