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          • α-酮戊二酸脫氫酶活性測定試劑盒 三羧酸循
          • α-酮戊二酸脫氫酶活性測定試劑盒 三羧酸循
          產品名稱:

          α-酮戊二酸脫氫酶活性測定試劑盒 三羧酸循

          產品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
          廠商性質: 生產廠家 產品時間: 2024-04-24
          儲存條件
          -20℃
          中文名稱
          α-酮戊二酸脫氫酶活性測定試劑盒 三羧酸循
          有效期
          6個月
          單位

          英文名稱
          α-Ketoglutarate Dehydrogenase(α-KGDH) Activity Assay Kit
          檢測方法
          紫外分光光度法 Spectrophotometer
          規格
          50T/48S

          產品概述

          品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
          分子式詳詢純度詳詢
          分子量詳詢貨號BC0710
          規格50管/48樣供貨周期現貨
          主要用途α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)活性檢測應用領域環保,化工,生物產業,農林牧漁,綜合

          α-酮戊二酸脫氫酶α-KGDH)活性檢測試劑盒說明書
          紫外分光光度法
          注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
          貨號BC0710
          規格50T/48S
          產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

          試劑名稱規格保存條件
          試劑一液體60 mL×1瓶2-8℃保存
          試劑二液體0.6 mL×1支-20℃保存
          試劑三液體60 mL×1瓶2-8℃保存
          試劑四液體1.2 mL×1支2-8℃保存
          試劑五粉劑×22-8℃保存
          試劑六粉劑×2-20℃保存
          試劑七粉劑×2-20℃保存
          試劑八粉劑×2-20℃保存

          溶液的配制:

          1. 試劑二:為易揮發試劑,用完后盡快密封,-20℃保存;

          2. 試劑五:臨用前取1支試劑五,加入1 mL試劑三,充分溶解,可2-8保存4周;

          3. 試劑六:提供一個5 mL試劑瓶,臨用前取1支試劑六,加入3 mL試劑三,充分溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復凍融;

          4. 試劑七:臨用前取1支試劑七加入1.5 mL試劑三充分溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復凍融;

          5. 劑八:臨用前取1支試劑八,加入1 mL蒸餾水,充分溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復凍融;

          6. 工作液的配制:臨用前依次取22 mL試劑三、0.5 mL試劑四、1 mL試劑五、2.75 mL試劑六、1.25 mL試劑七(共27.5mL,約27T,充分混合待用,現用現配。

          產品說明:
          α-KGDHEC 1.2.4.2)廣泛存在于動物、植物微生物和培養細胞的線粒體中,是三羧酸循環調控關鍵酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰輔*A
          α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+和輔*A生成琥珀酰輔*A、二氧化碳和NADHNADH340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。


          注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
          需自備的儀器和用品:
          紫外分光光度計、水浴鍋/恒溫培養箱、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

          操作步驟:“具體操作步驟詳見“產品資料"附件"

          注意事項:

          1. 測定過程中所有試劑和樣本在冰上放置,以免變性和失活。

          2. 比色皿中反應液的溫度必須保持37℃或25℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃25℃蒸餾水,將此燒杯放

          入37℃或25℃水浴鍋中。在反應過程中把比色皿連同反應液放在此燒杯中。

          1. 最好兩個人同時做此實驗,一個人比色,一個人計時,以保證實驗結果的準確性。

          2. 測定管的ΔA值在0.01-0.25之間,若測定管的ΔA值大于0.25,需將樣本進行稀釋。

          3. 由于提取液中含有一定濃度的蛋白(約1mg/mL),所以在測定樣本蛋白濃度時需要減去提取液本身的蛋白含量。

          實驗實例:

          1. 取0.1g稗草進行樣本處理,將取上清稀釋2倍后按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A4-A3=0.323-0.312=0.011ΔA空白=A2-A1=0按樣本質量計算酶活得:

          α-KGDH活性(U/g 質量)=1488.5×(ΔA測定-ΔA空白)÷W×2(稀釋倍數)=327.47 U/g 質量。

          1. 取0.1g小鼠肝臟進行樣本處理,4℃ 11000g離心10min,取上清后按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A4-A3=1.2-0.957=0.243ΔA空白=A2-A1=0按樣本質量計算酶活得:

          α-KGDH活性(U/g 質量)=1488.5×(ΔA測定-ΔA空白)÷W=3617.055 U/g 質量。
          相關發表文獻:

          1. Jianyun Yue,Changjian Du,Jing Ji,et al. Inhibition of α-ketoglutarate dehydrogenase activity afects adventitious root growth in poplar via changes in GABA shunt. Planta. July 2018;(IF3.06)

          2. Xiao Li,Qi Zhao,Jianni Qi,et al. lncRNA Ftx promotes aerobic glycolysis and tumor progression through the PPARγ pathway in hepatocellular carcinoma. International Journal of Oncology. May 2018; (IF3.571)

          參考文獻:

          1. Park L C H, Calingasan N Y, Sheu K F R, et al. Quantitative α-ketoglutarate dehydrogenase activity staining in brain sections and in cultured cells[J]. Analytical biochemistry, 2000, 277(1): 86-93.

          相關系列產品:
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          α-酮戊二酸脫氫酶活性測定試劑盒 三羧酸循  α-酮戊二酸脫氫酶活性測定試劑盒 三羧酸循


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