丙酮酸脫氫酶（PDH）檢測試劑盒 三羧酸循環

丙酮酸脫氫酶（PDH）活性檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。

貨號：BC0380

規格：50T/48S

產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：為易揮發試劑，用完后盡快密封，-20℃保存；

2. 工作液的配制：臨用前把11.5mL試劑四、一支試劑五、0.9mL 試劑六、3.5mL試劑七轉移到一瓶試劑三中混合溶解待用（共30.9mL，約34T）；用不完的試劑-20℃分裝保存，可保存4周。避免反復凍融。

產品說明：

PDH（EC 4.1.1.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是丙酮酸脫氫酶復合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶，催化丙酮酸脫梭生成-TPP，把糖酵解和三羧酸循環連接起來。PDH催化丙酮酸脫氫，同時還原2,6-二氯酚靛酚（2,6-DCPIP），從而導致605nm光吸收的減少。

Pyruvic Acid + Thiamine Pyrophosphate             Hydroxyethyl Thiamine Pyrophosphate

Dichlorophenolindophenol(605nm) + Hydroxyethyl Thiamine Pyrophosphate       Reduced Dichlorophenolindophenol

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

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