谷*甘肽還原酶(GR)活性檢測(cè)試劑盒 輔酶

谷*甘肽還原酶（GR）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
紫外分光光度法
貨號(hào)：BC1160
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入3mL蒸餾水溶解備用，2-8℃可保存4周；

2. 試劑三：試劑存于試劑瓶?jī)?nèi)玻璃瓶中；臨用前加入6mL蒸餾水溶解備用，-20℃可分裝保存4周，避免反復(fù)凍融。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、移液器、勻漿器/研缽/細(xì)胞超聲破碎儀、1mL石英比色皿、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

1. 樣本處理等過程均需要在冰上進(jìn)行，且須在當(dāng)日測(cè)定酶活力，勻漿液避免反復(fù)凍融；

2. 測(cè)定前須先用1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，哺乳動(dòng)物組織一般須用試劑一稀釋2-5倍；

3. 由于試劑一中含有一定濃度的蛋白（約0.1mg/mL），所以在測(cè)定樣本蛋白濃度時(shí)需要減去試劑一本身的蛋白含量。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g桃樹葉片加入1.0 mL試劑一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清液稀釋4倍按測(cè)定步驟檢測(cè)，ΔA測(cè)定管=A測(cè)1-A測(cè)2=1.033-0.953=0.08，ΔA空白管=A空1-A空2=0.768-0.762=0.006，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：GR酶活(U/g 質(zhì)量)=0.536×(ΔA測(cè)定管-ΔA空白管)÷W×4（稀釋倍數(shù)）=1.587 U/g 質(zhì)量。

2. 取0.1g大鼠肝臟組織加入1.0 mL試劑一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清液稀釋8倍按測(cè)定步驟檢測(cè)，ΔA測(cè)定管=A測(cè)1-A測(cè)2=0.886-0.533=0.353，ΔA空白管=A空1-A空2=0.768-0.762=0.006，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：GR酶活(U/g 質(zhì)量)=0.536×(ΔA測(cè)定管-ΔA空白管)÷W×8（稀釋倍數(shù)）=14.88 U/g 質(zhì)量。

相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

1. Hua Li,Lanying Wang,Yanping Luo. Composition Analysis by UPLC-PDA-ESI (?)-HRMS and Antioxidant Activity Using Saccharomyces cerevisiae Model of Herbal Teas and Green Teas from Hainan. Molecules. October 2018;(IF3.06)

2. Zeyong Zhang,Huanhuan Liu,Ce Sun,et al. A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice. Journal of Plant Physiology.October 2018;(IF2.825)

3. Li S, Tian Y, Wu K, et al. Modulating plant growth–metabolism coordination for sustainable agriculture[J]. Nature, 2018, 560(7720)：595-600.

參考文獻(xiàn)：

1. Demiral T, Türkan I. Comparative lipid peroxidation, antioxidant defense systems and proline content in roots of two rice cul  tivars differing in salt tolerance[J]. Environmental and experimental botany, 2005, 53(3): 247-257.

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