維生素D3含量檢測(cè)試劑盒 微量法

維生素 D3 含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

高效液相色譜法 

注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。 

貨號(hào): BC4884 

規(guī)格:50T/48S 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：維生素 D3 是一種脂溶性*生素。維生素 D3 的生物學(xué)功能與其代謝產(chǎn)物鈣三醇密切相關(guān)，主要功能包括提高機(jī)體對(duì)鈣和磷的吸收、促進(jìn)新骨的生成及鈣化、調(diào)節(jié)肝臟中鈣結(jié)合蛋白質(zhì)的合成等。維生素 D3 在 265 nm 處存在紫外吸收，可利用紫外檢測(cè)器測(cè)定其含量。 

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：高效液相色譜儀（ZORBAX Extend C18 色譜柱（4.6×250 mm），紫外檢測(cè)器（VWD））、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、混勻儀、EP 管、針頭式過(guò)濾器（有機(jī)系）、注射器、抽濾器、濾膜（水系、有機(jī)系）、棕色進(jìn)樣瓶、超純水、甲醇（色譜純）。 

產(chǎn)品內(nèi)容：提取液：液體 60 mL ×1 瓶，4℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加入 1 mL 甲醇配制成 5 mg/mL 維生素 D3 標(biāo)準(zhǔn)溶液，4℃密封保存，避免陽(yáng)光直射。 

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：1. 將甲醇（色譜純）用有機(jī)系濾膜抽濾。2. 將抽濾好的流動(dòng)相超聲 20 min，除去氣泡。4. 標(biāo)準(zhǔn)品的配制：將 5 mg/mL 的維生素 D3 標(biāo)準(zhǔn)溶液用甲醇稀釋成 1000 μg/mL、500 μg/mL、100μg/mL、20 μg/mL、4 μg/mL、0.8 μg/mL 的維生素 D3 標(biāo)準(zhǔn)溶液。4℃避光保存（密封），測(cè)試前采用有機(jī)系針頭式過(guò)濾器過(guò)濾到棕色進(jìn)樣瓶?jī)?nèi)，待測(cè)

注意事項(xiàng) 

1. 測(cè)試完畢后，需要用高濃度的超純水相清洗色譜柱（約 20-30 個(gè)柱體積），再用高濃度的有機(jī)相沖洗色譜柱，最后按柱子的種類規(guī)范沖洗，防止損傷色譜柱。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋倍數(shù)要根據(jù)樣品中維生素 D3 的濃度確定，樣品中維生素 D3 的濃度必須在標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度范圍之內(nèi)，該標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋倍數(shù)只是一個(gè)參考。若樣本中維生素 D3 濃度過(guò)高，建議稀釋后再測(cè)。

3.  若樣本量過(guò)大，建議每天測(cè)試一次標(biāo)準(zhǔn)溶液（一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液即可），以確定相應(yīng)的保留時(shí)間，待測(cè)溶液測(cè)試前須放置至室溫狀態(tài)。

4. 為了排除溶劑的影響，可進(jìn)行一次空白檢測(cè)

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