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品牌	SOLARBIO/索萊寶	CAS	詳詢
分子式	詳詢	純度	詳詢
分子量	詳詢	貨號	BC1400
規格	50T/24S	供貨周期	現貨
主要用途	總果膠含量檢測	應用領域	環保,化工,生物產業,農林牧漁,綜合

總果膠含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號：BC1400
規格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規格	保存條件
提取液一	液體110 mL×1瓶	2-8℃保存
提取液二	液體70 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體60 mL×1瓶（自備）	2-8℃保存
試劑二	液體3 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體5 mL×1瓶	2-8℃保存
標準品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑一：自備濃硫酸。
標準品：10 mg半乳糖醛酸，臨用前加入0.943 mL提取液二，配成50 μmol/mL的標準液。

產品說明：
果膠是植物細胞壁主要組成成分之一，分為水溶性果膠和不溶性果膠（原果膠或堿溶性果膠）。果膠是一種天然高分子化合物，具有良好的膠凝化和乳化穩定作用，已廣泛用于食品、醫藥、日化及紡織行業。
原果膠在稀酸中水解為可溶性果膠，與原有的可溶性果膠進一步轉化為半乳糖醛酸，產物在強酸中與咔唑縮合生成紫紅色化合物，在530nm處有特征吸收峰。
技術指標：
低檢出限：0.0237 μmol/mL
線性范圍：0.0625-1.5 μmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、濃硫酸、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
將組織樣本搗碎，按照樣本質量(g)和提取液一體積(mL)為1: 20的比列（建議取約0.05g樣本，加入1mL提取液一），置于90℃恒溫水浴鍋中浸提30min，取出冷卻后于5000g、25℃離心10min，去掉上清，沉淀中再加入1mL提取液一重復操作一次，離心后去上清，沉淀中加入1mL提取液二，置于90℃恒溫水浴鍋中水解1h，取出冷卻后于8000g、25℃離心15min，取上清液待測。
二、測定步驟

分光光度計預熱30min以上，調節波長至530nm，蒸餾水調零。
標準品的制備：將50μmol/mL 標準液用提取液二稀釋為1.5、1、0.5、0.25、0.125、0.0625 μmol/mL的標準溶液備用。
操作表：

試劑名稱	空白管	標準管	對照管	測定管
樣本（μL）	-	-	100	100
標準品（μL）	-	100	-	-
蒸餾水（μL）	100	-	-	-
試劑一（μL）	800	800	800	800
混勻、90℃放置10min，取出后冷卻
試劑二（μL）	-	-	100	-
試劑三（μL）	100	100	-	100
混勻，25℃靜置30min后測定530nm處吸光值，分別記為A空白管、A標準管、A對照管和A測定管。ΔA標準=A標準管-A空白管，ΔA測定=A測定管-A對照管。

三、總果膠含量的計算

標準曲線的繪制：

以各個標準溶液的濃度為x軸，其對應的ΔA標準為y軸，繪制標準曲線，得到標準方程y=kx+b，將ΔA測定帶入方程得到x（μmol/mL）。

總果膠含量的計算：

總果膠含量(μmol/g 質量)=x×V提取液二÷W=x÷W
V提取液二：加入提取液二的體積，1mL；W：樣本質量，g。
注意事項：

濃硫酸具有強腐蝕性，操作時需特別注意，90℃加熱、冷卻后再打開蓋子，以防液體飛濺燒傷。
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。

實驗實例：

取0.05g蘋果果肉進行樣本處理，取上清液5倍稀釋后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定管=A測定管-A對照管=0.34-0.05=0.29，依據標準曲線y=0.7498x+0.017，計算x=0.364，按樣本質量計算：總果膠含量(μmol/g 質量)= x×5（稀釋倍數）÷W=36.4 μmol/g 質量。