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品牌	SOLARBIO/索萊寶	CAS	詳詢
分子式	詳詢	純度	詳詢
分子量	詳詢	貨號	BC4270
規格	50T/48S	供貨周期	現貨
主要用途	支鏈淀粉含量檢測	應用領域	環保,化工,生物產業,農林牧漁,綜合

支鏈淀粉含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC4270
規格：50T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規格	保存條件
試劑一	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體50 mL×1瓶（自備）	2-8℃保存
試劑三	液體30 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑四	-	2-8℃保存
試劑五	液體6 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑六	液體10mL×1瓶	2-8℃保存
標準品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：*50 mL自備。
試劑四：提供125 mL空瓶一個；將試劑三：H₂O =9 mL：91 mL混勻，現用現配，2-8℃保存半年。
標準品：10 mg支鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三，混勻后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10 mg/mL的支鏈淀粉，2-8℃保存半年。

產品說明：
支鏈淀粉又稱膠淀粉，一般由幾千個葡萄糖殘基組成，淀粉中直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例和含量對淀粉產品的加工、物化特性、糊化溫度等有著直接的影響。
支鏈淀粉和碘形成紅紫色絡合物，利用乙醇分開樣本中的可溶性糖和淀粉，再用碘與其反應得到支鏈淀粉含量。

技術指標：
低檢出限：0.0044 mg/mL
線性范圍：0.0125-0.5 mg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、天平、臺式離心機、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、*、無水乙醇、EP管。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

稱取0.005g烘干樣本，加入1mL試劑一，充分勻漿；
80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟2沉淀中加入1mL試劑二（*）振蕩 5min；3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清待測。

二、測定步驟

分光光度計預熱30min以上，調節雙波長至530nm和755nm，蒸餾水調零。
標準液的稀釋：將10 mg/mL的標準溶液用試劑四稀釋至0.5、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125 mg/mL標準溶液待測。
標準液稀釋可參考下表：

序號	稀釋前濃度（mg/mL）	標準液體積（µL）	試劑四體積（µL）	稀釋后濃度（mg/mL）
1	10	100	1900	0.5
2	0.5	800	200	0.4
3	0.4	500	500	0.2
4	0.2	500	500	0.1
5	0.1	500	500	0.05
6	0.05	500	500	0.025
7	0.025	500	500	0.0125

備注：實驗中每個標準管需200µL標準溶液。

操作表：(在1.5mL離心管中依次加入下列試劑)

試劑名稱	測定管	標準管	空白管
樣本（µL）	200	-	-
標準溶液（μL）	-	200	-
蒸餾水（µL）	-	-	200
試劑五（µL）	75	75	75
試劑六（µL）	50	50	50
蒸餾水（µL）	675	675	675
充分混勻，測定530nm和755nm處的吸光值，530nm下的測定管、標準管、空白管分別記為A測定、A標準和A空白，755nm下的分別記為A’測定、A’標準、A’空白，計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白），ΔA標準=（A標準-A空白）-（A’標準-A’空白）。標準曲線和空白管只需測定1-2次。

三、支鏈淀粉含量計算

標準曲線的建立

以支鏈淀粉標準溶液濃度為x軸（x，mg/mL），標準溶液對應的ΔA標準為y軸（y，ΔA標準），建立標準曲線，得到標準方程y=kx+b，將ΔA測定帶入方程得到x（mg/mL）。

支鏈淀粉含量（mg/g 質量）=x×V樣總÷W=5x÷W

V樣總：加入試劑四體積，5mL；W：樣本質量，g。
注意事項：

反應后建議在20min內檢測完成防止褪色。
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。注意同步修改計算公式。

實驗實例：

取0.01g紅豆于研缽中研碎，加入1mL試劑一，進行樣本處理取上清3倍稀釋后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白）=（0.370-0.045）-（0.233-0.015）=0.107，帶入標準曲線y=0.7564x-0.0006計算x=0.1423，按樣本質量計算含量得：

支鏈淀粉含量（mg/g 質量）=5x÷W×3（稀釋倍數）=213.45 mg/g 質量。
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支鏈淀粉含量檢測試劑盒

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