亮*酸氨基肽酶活性檢測試劑盒 微量法

亮*酸氨基肽酶（LAP）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC4145
規格：100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
試劑二：臨用前加入2.5 mL丙 酮溶解。
產品說明：
LAP是一種膜結合酶，廣泛存在于肝、膽、胰等組織中，參與組織蛋白和某些肽類的降解更新。各類肝病患者因肝細胞損傷，血清LAP的活性均有不同程度的升高，LAP可以作為各類肝病的一項初步檢測指標，特別是肝癌鑒別診斷的指標。
LAP分解L-亮*酸對硝基 苯胺生成對硝基 苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算LAP活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、丙 酮、勻漿器/研缽、冰、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
1、ΔA大于0.5時或者A值大于1.5時建議將樣本上清用試劑一稀釋后再進行測定。
2、空白管的ΔA變化小于0.01。
實驗實例：

1. 取0.1g小鼠腎臟加入1mL試劑一進行勻漿研磨，取上清按照測定步驟操作，用微量玻璃比色皿測得計算ΔA測定管= A2測定-A1測定=0.4537-0.3691=0.0846，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.0157-0.0133=0.0024，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0846-0.0024=0.0822，按樣本質量計算酶活得：LAP（U/g 質量）=675.4×ΔA÷W=675.4×0.0822÷0.1=555.1788 U/g 質量。

2. 取雞血清直接按照測定步驟操作，用微量玻璃比色皿測得計算ΔA測定管= A2測定-A1測定=0.094-0.0798=0.0142，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.0157-0.0133=0.0024，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0142-0.0024=0.0118，按樣本質量計算酶活得：LAP（U/g 質量）=675.4×ΔA=675.4×0.0118=7.9697 U/g 質量。

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