脲酶（UE）活性檢測試劑盒 微量法

脲酶（UE）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC4115
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：臨用前加3mL蒸餾水充分溶解；

2. 試劑三：臨用前將A液倒入B液中混合，待用；

3. 標準品：1mg/mL氮標準液。用蒸餾水稀釋至2μg/mL備用。

產品說明：
脲酶（UE）廣泛分布于植物的種子中，也存在于動物的血液和尿液中，某些微生物也能分泌脲酶。UE能夠水解尿素產生氨和碳酸，對尿素轉化起關鍵作用。利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產生的NH₃-N來反應UE活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、天平、研缽/勻漿器、低溫離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
ΔA測定大于0.6時，建議將反應混合液用蒸餾水稀釋或者樣本用蒸餾水稀釋后在進行測定。

實驗實例：

1. 取0.1g綠豆加入1mL提取液進行樣本處理，取上清后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA= A測定管-A對照管=0.152-0.092=0.047，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.241-0.041=0.200，按樣本質量計算酶活得：UE活力（U/g質量）=0.233×ΔA測定÷ΔA標準÷W=0.233×0.047÷0.2÷0.1=0.548 U/g質量。

2. 取0.1g腎臟加入1mL提取液進行樣本處理，取上清后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA= A測定管-A對照管=0.215-0.162=0.053，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.241-0.041=0.200，按樣本質量計算酶活得：UE活力（U/g質量）=0.233×ΔA測定÷ΔA標準÷W=0.233×0.053÷0.2÷0.1=0.6175 U/g質量。

3. 取火雞血清20μL直接按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算計算ΔA標準=A測定管-A對照管=0.145-0.097=0.048，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.241-0.041=0.200，按液體體積計算酶活得：UE活力（U/mL）=0.233×ΔA測定÷ΔA標準=0.233×0.048÷0.2=0.0559 U/mL。

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