花青素還原酶（ANR）活性檢測試劑盒 微量法

花青素還原酶（ANR）活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號：BC4090
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 提取液：內(nèi)含不溶物，使用前搖勻。

2. 試劑二：臨用前加入3 mL蒸餾水備用。-20℃可分裝保存4周，避免反復(fù)凍融。

3. 試劑三：粉劑置于試劑瓶內(nèi)玻璃管中。臨用前加入1 mL乙醇和1 mL蒸餾水混勻溶解備用。可以分裝后-20℃保存4周，避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品說明：
花青素還原酶（ANR）是原花青素生物合成途徑中的關(guān)鍵酶，使花色素轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的順式黃烷-3-醇，在植物體內(nèi)起著非常重要的調(diào)控作用。
NADPH在ANR作用下將花色素轉(zhuǎn)化為黃烷-3-醇和NADP，在340nm下測定NADPH的減少速率，即可反映ANR活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、乙醇、冰和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟請查閱產(chǎn)品資料附件

注意事項：

1. 當(dāng)ΔA大于0.4或者A對照管大于1時，建議將反應(yīng)混合液用試劑一稀釋更大倍數(shù)或者減少加入的樣本體積進行測定；ΔA過小時，可以增加酶促反應(yīng)時間（45min或60min）或增加加入的樣本體積來測定。

2. 加入試劑四后，請在15min內(nèi)測定完成。

3. 樣本蛋白濃度另行測定。

實驗實例：

1. 取0.1g蘋果加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得計算ΔA=A對照管-A測定管=0.922-0.813=0.109，按樣本質(zhì)量計算酶活得：ANR酶活（U/g質(zhì)量）=107.18×ΔA÷W=107.18×0.109÷0.1=116.83 U/g 質(zhì)量。

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