花青素還原酶（ANR）活性檢測試劑盒 微量法

花青素還原酶（ANR）活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號：BC4090
規格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 提取液：內含不溶物，使用前搖勻。

2. 試劑二：臨用前加入3 mL蒸餾水備用。-20℃可分裝保存4周，避免反復凍融。

3. 試劑三：粉劑置于試劑瓶內玻璃管中。臨用前加入1 mL乙醇和1 mL蒸餾水混勻溶解備用。可以分裝后-20℃保存4周，避免反復凍融。

產品說明：
花青素還原酶（ANR）是原花青素生物合成途徑中的關鍵酶，使花色素轉變為相應的順式黃烷-3-醇，在植物體內起著非常重要的調控作用。
NADPH在ANR作用下將花色素轉化為黃烷-3-醇和NADP，在340nm下測定NADPH的減少速率，即可反映ANR活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、乙醇、冰和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟請查閱產品資料附件

注意事項：

1. 當ΔA大于0.4或者A對照管大于1時，建議將反應混合液用試劑一稀釋更大倍數或者減少加入的樣本體積進行測定；ΔA過小時，可以增加酶促反應時間（45min或60min）或增加加入的樣本體積來測定。

2. 加入試劑四后，請在15min內測定完成。

3. 樣本蛋白濃度另行測定。

實驗實例：

1. 取0.1g蘋果加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得計算ΔA=A對照管-A測定管=0.922-0.813=0.109，按樣本質量計算酶活得：ANR酶活（U/g質量）=107.18×ΔA÷W=107.18×0.109÷0.1=116.83 U/g 質量。

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