土壤β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶試劑盒

土壤β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶（S-C1）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
微量法
貨號(hào)：BC4035
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：甲苯自備。

2. 試劑二：臨用前每瓶加入7.5 mL試劑三，充分溶解備用，用不完的試劑仍2-8℃保存一周。

3. 標(biāo)準(zhǔn)品：5 mmol/L的對(duì)硝基 苯* 溶液。 

產(chǎn)品說(shuō)明：
β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶(C1，EC3.2.1.91)存在于細(xì)菌、真菌和動(dòng)物體內(nèi)，是纖維素酶系的組份之一，C1酶作用于纖維素線狀分子的末端，水解β-葡萄糖苷鍵，每次切下 1個(gè)纖維二糖分子。
S-C1能夠催化對(duì)硝基 苯纖維二糖苷(PNPC)生成對(duì)-硝基 苯*，后者在400nm有特征光吸收。 
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、30-50目篩、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng)：
當(dāng)吸光值大于1.5時(shí)，建議將上清液用試劑三稀釋后測(cè)定或者減少土樣質(zhì)量測(cè)定。計(jì)算時(shí)同步修改計(jì)算公式。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取兩管0.03g土樣，即為測(cè)定管和對(duì)照管，按照測(cè)定步驟操作，記為A測(cè)定管、A對(duì)照管。用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.444-0.244=0.2，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.413-0.048=0.365，計(jì)算酶活得：S-C1活力（U/g土樣）=0.684× ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.684×0.2÷0.365÷0.03=12.493 U/g 土樣。

2. 取兩管0.03g林土樣，即為測(cè)定管和對(duì)照管，按照測(cè)定步驟操作，記為A測(cè)定管、A對(duì)照管。用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.33-0.195=0.135，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.413-0.048=0.365，計(jì)算酶活得：S-C1活力（U/g土樣）=0.684×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.684×0.1135÷0.365÷0.03=8.4329 U/g 土樣。

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