土壤亮*酸氨基肽酶活性檢測試劑盒 微量法

土壤亮*酸氨基肽酶（S-LAP）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC4025
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1瓶加入1.875 mL丙 酮溶解，用不完的試劑2-8℃保存一周。

產品說明：
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮*酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機體某些病理狀態密切相關。
S-LAP分解L-亮*酸對硝基 苯胺生成對硝基 苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、離心機、水浴鍋、研缽、甲苯（不允許快遞）、丙 酮（不允許快遞）、30-50目篩、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
取新鮮土樣自然風干或37℃烘干，過30-50目篩。
二、測定步驟

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min以上，波長調至405nm，分光光度計蒸餾水調零。

2. 加樣表：

實驗實例：

1. 稱取兩管0.03g三葉草土樣，分別記為測定管和對照管，按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.6-0.17=0.43，計算酶活得：

S-LAP活性（U/g 土樣）=0.844×ΔA÷W=0.844×0.43÷0.03=12.097U/g 土樣。

1. 稱取兩管0.03g土樣，分別記為測定管和對照管，按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.569-0.128=0.441，計算酶活得：

S-LAP活性（U/g 土樣）=0.844×ΔA÷W=0.844×0.441÷0.03=12.407U/g 土樣。
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