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          當前位置:首頁產品中心生化檢測試劑盒-常量法土壤系列BC3980-50T/24S土壤脂肪酶(S-LPS)活性檢測試劑盒

          土壤脂肪酶(S-LPS)活性檢測試劑盒
          產品簡介:

          儲存條件
          2-8℃
          中文名稱
          土壤脂肪酶(S-LPS)活性檢測試劑盒
          有效期
          6個月
          單位

          英文名稱
          Soil Lipase(S-LPS) Activity Assay Kit
          檢測方法
          可見分光光度法 Spectrophotometer
          規格
          50T/24S
          自備試劑
          該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網站說明書

          產品型號:BC3980-50T/24S

          更新時間:2024-04-12

          廠商性質:生產廠家

          訪 問 量 :650

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          土壤脂肪酶(S-LPS)活性檢測試劑盒說明書
          可見分光光度法
          貨號: BC3980
          規格: 50T/24S
          產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

          試劑名稱規格保存條件
          試劑一液體30 mL×1瓶2-8℃保存
          試劑二液體6 mL×1瓶常溫保存
          試劑三粉劑×12-8℃保存
          試劑四液體20 mL×1瓶2-8℃保存
          標準品液體59.3 μL×1支2-8℃保存

          溶液的配制:

          1. 標準品:臨用前加入1.97 mL甲苯,即100 μmol/mL油酸。用前注意解凍溶解。用不完的試劑可以2-8℃保存一個月。

          2. 工作液的配制:將試劑三臨用前加入20 mL蒸餾水于沸水浴中溶解,2-8℃保存兩周。冷卻至常溫后加入5 mL試劑二混合,高速震蕩2次,每次3min,間隔5min。可根據該比例現用現配。

          產品說明:
          脂肪酶(LPS)又稱甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。該酶在土壤生物動力學中具有重要的作用。
          LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測定脂肪酸生成速率,即可計算LPS活性。
          注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
          需自備的儀器和用品:
          可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、臺式離心機、震蕩混勻器、恒溫水浴鍋/恒溫培養箱、可調式移液槍、研缽、甲苯(不可快遞)、冰和蒸餾水、30-50目篩。
          操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
          一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
          新鮮土樣自然風干,過30-50目篩。
          二、測定步驟

          1. 分光光度計預熱30min以上,調節波長至710nm,甲苯調零。

          2. 標準溶液的稀釋:取50µL 100µmol/mL油酸標準溶液,加入950µL甲苯,充分混勻,配制成5µmol/mL標準溶液待測,現用現配。(實驗中每管需要1mL。)

           

          1. 操作表:取2mL EP管,加入下列試劑

          加入試劑(μL)對照管測定管標準管空白管
          土樣(g)0.10.1--
          甲苯5050--
          使土樣充分潤濕,常溫放置10min。--
          試劑一500500--
          工作液-500--
          置于37℃恒溫培養箱或37℃恒溫水浴鍋中準確反應1h,期間可震蕩數次使土樣和樣本充分接觸。之后沸水浴10min(纏封口膜,防止EP管崩開導致水分散失),自然冷卻至室溫。--
          工作液500---
          甲苯12001200--
          反復震蕩混勻后,室溫4000rpm離心10 min--

          取出離心管,小心吸取上層有機相1mL,加入另一1.5mL EP管中,按下表操作:

          上層溶液10001000--
          5µmol/mL標準溶液--1000-
          甲苯---1000
          試劑四250250250250

          反復充分震蕩混勻;室溫4000rpm離心10min,小心吸取上層有機相溶液800μL,加入1mL玻璃比色皿,于710nm處測定吸光值。記為A對照管、A測定管、A標準管、A空白管,計算ΔA測定=A測定管-A對照管,ΔA標準=A標準管-A空白管。空白管和標準管只需做1-2次。

          注意事項:
          1、甲苯有毒,實驗過程中需佩戴手套和口罩。
          2、實驗過程中須遠離火源。
          3、當吸光度大于0.8時,建議將樣本稀釋后測量(第二次加入甲苯的量增加)。
          4、甲苯可溶解聚苯乙烯/聚丙烯材質。

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