土壤堿性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法

土壤堿性蛋白酶（S-ALPT）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC0885
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1瓶加入6 mL試劑一，沸水浴攪拌溶解后待用，用不完的試劑可以2-8℃保存4周；

2. 標準品：20 μmol/mL 酪*酸溶液。

產品說明：
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化，其水解產物是高等植物的氮源之一。土壤堿性蛋白酶在堿性環境下催化蛋白質水解，與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。堿性條件下，土壤堿性蛋白酶可將酪蛋白水解產生酪*酸；在堿性條件下，酪*酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍，在680nm有特征吸收峰。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋/恒溫培養箱、臺式離心機、可調式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水、30-50目篩。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
當吸光值大于1.5時，建議將上清液用蒸餾水稀釋后進行測定，計算時注意乘以稀釋倍數。
實驗實例：

1. 分別稱取0.05g三葉草土于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管，按照測定步驟操作，用96孔板測定吸光度，計算ΔA測定=A測定-A對照=0.234-0.180=0.054，ΔA標準=A標準-A空白=0.374-0.045=0.329，按土壤質量計算酶活得：

土壤堿性蛋白酶(U/g 土樣)=0.05×ΔA測定÷ΔA標準÷W= 0.05×0.054÷0.329÷0.05=0.1641 U/g土樣。

1. 分別稱取0.05g森林10號土樣于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管，按照測定步驟操作，用96孔板測定吸光度，計算ΔA測定=A測定-A對照=0.829-0.566=0.263，ΔA標準=A標準-A空白=0.374-0.045=0.329，按土壤質量計算酶活得：

土壤堿性蛋白酶(U/g 土樣)=0.05×ΔA測定÷ΔA標準÷W= 0.05×0.263÷0.329÷0.05=0.7994 U/g土樣。
相關發表文獻：
[1]Manyun Zhang,Jun Wang, Shahla Hosseini Bai,et al. Evaluating the effects of phytoremediation with biochar additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi. Environmental Science and Pollution Research. May 2018;(IF2.914)
[2]Zhang M, Wang W, Wang J, et al. Dynamics of biochemical properties associated with soil nitrogen mineralization following nitrification inhibitor and fungicide applications[J]. Environmental Science and Pollution Research, 2017, 24(12): 11340-11348.
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