組織總磷含量檢測試劑盒 酶標法

組織總磷含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2855
規格：100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：強腐蝕性，強氧化性；易揮發，不使用時請及時蓋緊蓋子；

2. 試劑三A：臨用前加入5 mL蒸餾水溶解，用不完的試劑2-8℃保存4周；

3. 試劑三B：臨用前加入5 mL蒸餾水溶解，用不完的試劑2-8℃保存4周；

4. 試劑三：臨用前按試劑三A：試劑三B：試劑二=1:1:1的體積比例配制，配好的試劑三應為淺黃色。若無色則試劑失效，若是藍色則為磷污染，試劑三根據樣本量現用現配，限當天使用；

5. 標準品：10mmol/L無機磷標準液。

產品說明：
磷的存在形態包括無機磷與有機磷。無機磷主要指磷酸根，參與生物體內多種代謝，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質磷酸化和脫磷酸化等。通過測定總磷與無機磷含量即可了解作物對磷的利用率，進而為合理施肥提供依據。
總磷經消化后，轉化成無機磷。鉬藍法是測定無機磷含量的經典方法，一定條件下，鉬藍與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質，通過測定660nm光吸收，即可計算無機磷含量，進而可計算出組織中總磷含量。

技術指標：
低檢出限：0.0338 mmol/L
線性范圍：0.625-8 mmol/L
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水和濃硫酸（99%）。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

注意事項：
1、如果樣本測定吸光值大于1.5，需用蒸餾水做相應稀釋后進行測定。如果樣本測定吸光值較低或接近空白值，建議增大樣本量后重新進行測定。注意同步修改計算公式。
實驗實例：

1. 取0.1g小鼠腎臟按照提取步驟操作，離心取上清之后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算 A測定管=0.191，A空白管=0.051，A標準管=0.282，按樣本質量計算總磷含量得：總磷含量(mmol/g 質量)=0.005×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W= 0.030 mmol/g 質量。

2. 取0.1g小鼠脾按照提取步驟操作，離心取上清之后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算 A測定管=0.197，A空白管=0.051，A標準管=0.282，按樣本質量計算總磷含量得：總磷含量(mmol/g質量)=0.005×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W= 0.032 mmol/g 質量。

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