酸性木聚糖酶活性檢測試劑盒 微量法

酸性木聚糖酶（ACX）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2605
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
1、標準品：10mg木糖。臨用前加入667μL緩沖液配成100μmol/mL的標準品溶液，2-8℃保存8周。
產品說明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業中的原料細胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進有效物質的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進營養物質的吸收利用，因而廣泛的應用于釀造和飼料工業中，酸性木聚糖酶（ACX）一般分離自耐酸的真菌，細菌及部分霉菌。
ACX在酸性環境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，進一步在沸水浴條件下與3,5-二硝基水楊酸發生顯色反應，在540nm處有特征吸收峰，反應液顏色的深淺與酶解產生的還原糖量成正比，通過測定反應液在540nm吸光值增加速率，可計算ACX活力。


注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、可調式移液槍、冰、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
吸光度變化應該控制在0.01~1.3之間，否則加大樣本量或稀釋樣本，注意同步修改計算公式中的稀釋倍數。
實驗實例：

1. 取0.1079g藍莓加入1mL緩沖液進行勻漿研磨，取上清用蒸餾水稀釋20倍后按照測定步驟操作，用96孔板測得ΔA測定=A測定- A對照=0.933-0.795=0.138，帶入標曲y=0.2652x-0.0355（R²=0.9992），計算x=0.654，按樣本質量計算ACX活性得：ACX活力（U/g 質量）= x÷W÷30×F =0.654÷0.1079÷30×20=4.041 U/g 質量。

2. 取泡菜汁離心取上清按照測定步驟操作，用96孔板測得ΔA測定=A測定- A對照=0.354-0.245=0.109，帶入標曲y=0.2652x-0.0355（R²=0.9992），計算x=0.545，按發酵液計算ACX活力得：ACX活力（U/mL）= x÷T×F =0.545÷30×1=0.018U/mL。

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