纖維素酶(CL)活性檢測試劑盒 微量法

纖維素酶（CL）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC2545
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
標準品：10mg無水*萄糖（干燥失重<0.2%）。臨用前加入1mL蒸餾水溶解，配制成10mg/mL葡萄糖溶液備用，2-8℃保存兩周，或者用飽和苯甲酸溶液溶解，可保存更長時間。
產品說明：
CL（EC 3.2.1.4）存在于細菌、真菌和動物體內，能夠催化纖維素降解，是一類可廣泛應用于醫藥、食品、棉紡、環保及可再生資源利用等領域的酶制劑。
采用3,5-二硝基水楊酸法測定CL催化纖維素降解產生的還原糖的含量。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、低溫離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

1. 細菌或細胞：收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液，超聲冰浴破碎細菌或細胞（功率200w，超聲3秒，間隔10秒，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2. 組織：稱取約0.1g組織加入1mL提取液，冰浴中勻漿。8000g ，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

二、測定步驟
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長至540nm，分光光度計蒸餾水調零。
2、標準品的準備：將標準品用蒸餾水稀釋至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0mg/mL。
 

實驗中每個標準管需15µL標準溶液。
3、加樣表（在EP管中依次加入下列試劑）： 

相關發表文獻：
Guo Q, Du G, Qi H, et al. A nematicidal tannin from Punica granatum L. rind and its physiological effect on pine wood nematode (Bursaphelenchus xylophilus)[J]. Pesticide biochemistry and physiology, 2017, 135: 64-68.
參考文獻：
Faria M L, Kolling D, Camassola M, et al. Comparison of Pennicillium echinulatum and Trichoderma reesei cellulases in relation to their activity against various cellulosic substrates[J]. Biores. Technol, 2008, 99: 1417-1424.
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