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          • 3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
          • 3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
          產品名稱:

          3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法

          產品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
          廠商性質: 生產廠家 產品時間: 2024-04-11
          儲存條件
          -20℃
          中文名稱
          3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
          有效期
          6個月
          單位

          推薦
          若使用96孔板測定,需使用96孔UV板,推薦貨號YA0602
          英文名稱
          Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase(GAPDH) Activity Assay Kit
          別名
          3-磷酸甘油醛脫氫酶試劑盒 GAPDH Kit 3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAP

          產品概述

          品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
          分子式詳詢純度詳詢
          分子量詳詢貨號BC2215
          規格100T/96S供貨周期現貨
          主要用途測定意義:GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑應用領域環保,化工,生物產業,農林牧漁,綜合


          3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)活性檢測試劑盒說明書
          微量法
          貨號: BC2215
          規格:100T/96S
          產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
          試劑名稱規格保存條件
          提取液液體100 mL×1瓶2-8℃保存
          試劑一粉劑×1瓶-20℃保存
          試劑二液體20 mL×1瓶2-8℃保存
          試劑三液體12 µL×1瓶2-8℃保存
          溶液的配制:
          1. 試劑三:液體置于試劑瓶內EP管中。根據用量按照試劑三:蒸餾水為3:100的體積比例充分混勻,現用現配;

          2. 工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,根據需要取一定的量37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10min;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

          產品說明:
          GAPDH(EC1.2.1.12)催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關鍵酶,與糖異生途徑、體內血糖濃度的維持和糖尿病的發生密切相關,在機體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發揮重要作用。
          3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3-二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3-二磷酸甘油酸和NADH生成3-磷酸甘油醛、無機磷和NAD+,340nm處測定NADH的減少量可反映GAPDH活性的高低。
          注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
          需自備的儀器和用品:
          紫外分光光度計/酶標儀、低溫離心機、水浴鍋、微量石英比色皿/96孔UV板、可調式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
          操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
          注意事項:
          1. 當A1小于0.8或ΔA大于0.7時(96孔板為A1小于0.4或ΔA大于0.4),建議將樣本稀釋后再進行測定。

          2. 空白管為檢測各試劑組分質量的檢測孔,正常情況下,變化不超過0.02。

          實驗實例:
          1. 取0.1g兔腎臟加入1mL提取液,進行冰浴勻漿,然后8000g,4℃,離心20min,取上清置冰上,之后按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管= A1測定-A2測定=0.9333-0.2289=0.7044,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.6996,按樣本質量計算酶活得

          GAPDH酶活(U/g質量)=1072×ΔA÷W=7499.7 U/g質量。
          1. 取0.1g三葉草加入1mL提取液,進行冰浴勻漿,然后8000g,4℃,離心20min,取上清置冰上,之后按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管=A1測定-A2測定=1.0184-1.0042=0.0142,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0094,按樣本質量計算酶活得:

          GAPDH酶活(U/g質量)=1072×ΔA÷W=100.77 U/g質量。
          1. 取兔血清直接檢測,用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管=A1測定-A2測定=0.9528-0.9303=0.0225,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0177,按血清(漿)體積計算酶活得:

          GAPDH酶活(U/mL)=1072×ΔA=18.974 U/mL。
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          3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法 3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法 

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