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儲存條件
2-8℃
中文名稱
幾丁質(zhì)酶活性檢測試劑盒微量法
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Chitinase Activity Assay Kit
別名
幾丁質(zhì)酶測定試劑盒幾丁質(zhì)酶測定測試
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/48S

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產(chǎn)品概述

品牌	SOLARBIO/索萊寶	CAS	詳詢
分子式	詳詢	純度	詳詢
分子量	詳詢	貨號	BC0825
規(guī)格	100T/48S	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	測定意義：幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏	應(yīng)用領(lǐng)域	環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

幾丁質(zhì)酶活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC0825
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體8mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體9 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體3mL×1瓶	2-8℃保存
試劑四A	粉劑×2瓶	2-8℃保存
試劑四B	液體50mL×1瓶	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：此試劑為懸濁液，使用前需搖勻；
試劑三：此試劑為飽和溶液，低溫（2-8℃）條件取出會有晶體析出，60℃加熱使其溶解即可；
試劑四：臨用前取一瓶試劑四A，加入21mL試劑四B中，充分溶解，現(xiàn)用現(xiàn)配。用不完的試劑2-8℃可以保存4周（試劑四B若有結(jié)晶可37℃促進(jìn)溶解）；
標(biāo)準(zhǔn)品：5mg N-乙酰氨基葡萄糖。臨用前加入 1mL 試劑一配制成 5mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，即5000μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，2-8℃可以保存4 周。

產(chǎn)品說明：
幾丁質(zhì)酶主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官（例如烏賊的軟骨），以及真菌類的細(xì)胞壁中。而幾丁質(zhì)酶（EC 3.2.1.14）可催化幾丁質(zhì)水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點。
幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖，N-乙酰氨基葡萄糖與堿共熱產(chǎn)生的中間化合物可進(jìn)一步與對二甲氨基苯甲醛反應(yīng)產(chǎn)生顯色物質(zhì)，該顯色物質(zhì)在585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項：

反應(yīng)結(jié)束后盡快進(jìn)行比色。
吸光值大于1.5或者ΔA大于1時，樣本用提取液適當(dāng)稀釋再測定或者縮短37℃酶促反應(yīng)時間，注意同步修改計算公式。若ΔA小于0.01時，可以延長第一步37℃反應(yīng)時間或者加大樣本的加入量，注意修改計算公式。

實驗實例：

取0.111g蝦殼加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，用96孔板測定吸光度并計算ΔA=A測定-A對照=0.531-0.054=0.477，帶入標(biāo)曲y=0.007x+0.0205，得出x=65.214μg/mL，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

幾丁質(zhì)酶活性（U/g 質(zhì)量）=2.5×x÷W=1468.790U/g 質(zhì)量。

取0.113g平菇加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，用96孔板測定吸光度并計算ΔA=A測定-A對照=0.754-0.055=0.699，帶入標(biāo)曲y=0.007x+0.0205，得出x=96.929 μg/mL，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

幾丁質(zhì)酶活性（U/g 質(zhì)量）=2.5×x÷W=2144.437 U/g 質(zhì)量。
相關(guān)系列產(chǎn)品：
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