產品型號:BC1255-100T/96S
更新時間:2025-04-22
廠商性質:生產廠家
訪 問 量 :689
010-50973130
產品分類
L-半乳糖酸-1,4-內酯脫氫酶
(Gal LDH)活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號:BC1255
規格:100T/96S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
提取液 | 液體110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
試劑二 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑一:臨用前加入16 mL蒸餾水,充分溶解;
試劑二:臨用前加入2 mL蒸餾水,充分溶解。
產品說明:
L-半乳糖途徑是合成AsA的主要途徑。Gal LDH位于線粒體內膜,負責催化植物體內AsA生物合成的最后一步,也是該途徑的關鍵酶之一,對植物體內AsA含量的積累起著至關重要的作用。
Gal LDH催化L-半乳糖內酯還原氧化型細胞*C(Cyt c),還原型Cyt c在550nm有吸收峰;測定還原型Cyt c增加速率,來計算Gal LDH活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、可調式移液器、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項:
1、在測定酶活時要注意溫度。建議取小燒杯一只裝入一定量的25℃蒸餾水,將此燒杯放入25℃水浴鍋中,在反應過程中把比色皿連同反應液放在此燒杯中;若使用96孔板,反應期間應放入25℃培養箱中。
2、建議兩個人同時做此實驗,一個人比色,一個人計時,以保證實驗結果的準確性。
3、加入最后一種試劑后需迅速混勻并測定OD值。
實驗實例:
取0.1g土豆加入1mL提取液冰上充分研磨,13000g 4℃離心10min,取上清液置冰上,按照測定步驟操作,用微量比色皿測得計算ΔA測定管=A4-A3=0.9253-0.7844=0.1409,ΔA空白管=A2-A1=0,按樣本質量計算酶活得:Gal LDH(U/g 質量)=0.289×(ΔA測定管-ΔA空白管) ÷W=0.4072 U/g 質量。
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