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          • 小鼠骨形態發生蛋白9(BMP-9)ELISA試劑盒
          產品名稱:

          小鼠骨形態發生蛋白9(BMP-9)ELISA試劑盒

          產品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
          廠商性質: 生產廠家 產品時間: 2022-08-16
          Solarbio ELISA 試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯免疫吸附檢測技術。小鼠骨形態發生蛋白9(BMP-9)ELISA試劑盒是將抗小鼠BMP-9 單克隆抗體包被在酶標板上;分別加入梯度稀釋的標準品和預稀釋的樣本;洗板后加入生物素化抗小鼠BMP-9抗體;后,在λmax=450 nm(OD=450 nm)處測定反應孔樣品吸光度(OD),通過計算出樣本中小鼠BMP-9 的濃度。?

          產品概述

          品牌SOLARBIO/索萊寶貨號SEKM-0056
          規格96T/48T供貨周期現貨
          主要用途小鼠BMP-9含量測定應用領域醫療衛生,環保,化工,生物產業,農林牧漁

           

          小鼠骨形態發生蛋白9(BMP-9)ELISA試劑盒

          注意事項: 
          1. 試劑盒應在有效期內使用,請不要使用過期的試劑。 
          2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。 
          3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。 
          4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持*。 
          5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜(※)及潔凈塑料容器。. 
          6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶 7. 蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。 
          8. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內含的試劑代替本試劑盒 中的某單個組分。 
          9. 為保證結果準確,每次檢測均需做標準曲線。 


          安全提示: 
          試劑盒中的終止液為酸性溶液,操作小鼠員在使用時請帶上手套并注意防護;在操作過程中也要避免試 劑接觸皮膚和眼睛,如果不慎接觸,請用大量清水清洗;檢測血液樣本及其它體液樣本時,請按國家生物實驗室 安全防護有關管理規定執行。



           

          自備實驗器材(不提供,可代購) 
          1. 酶標儀(主波長 450nm,參考波長 630nm) 
          2. 高精度移液器及一次性吸頭:0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl 
          3. 洗板機或洗瓶 
          4. 37℃孵育箱 
          5. 雙蒸水,去離子水,量筒等 
          6. 稀釋用聚丙烯試管 
           

          小鼠骨形態發生蛋白9(BMP-9)ELISA試劑盒

          樣本收集及儲存: 
          1. 細胞培養上清: 將細胞培養基移無菌離心管,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于 -20℃下保存(24 小時內檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。 
          2. 血清樣本:室溫血液自然凝固20 min后,在4℃條件下1000×g離心10 min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃ 下保存(24 小時內檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。 


          3. 血漿樣本: 將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內檢 測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。

           
          ※注意:
          血清血漿樣本避免使用溶血、高血脂樣本,以免影響檢測結果;如果樣本中的靶標物檢測濃度高于 標準品的值,請將樣品做適當倍數稀釋后檢測,建議正式實驗前做預實驗以確定稀釋倍數。

           
          試劑準備: 
          1. 試劑回溫:首先在實驗前 30 min 將試劑盒,待測樣本放置于室溫下,濃縮洗滌液如出現結晶,請放入 37℃ 溫浴直到結晶全部溶解。


          2. 配制洗滌液:預先計算好稀釋后的洗滌液使用體積,然后用雙蒸水或去離子水將 20 倍濃縮洗滌液稀釋成 1 倍應用液,未用完的濃縮洗滌液放入 4℃冰箱保存。 


          3. 標準品梯度稀釋:加入標準品/樣本稀釋液(SR1)1000ul 凍干標準品中,靜置15分鐘待其*溶解后 輕輕混勻(濃度為2000pg/ml),按照以下濃度進行2倍稀釋:500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125pg/ml 進行稀釋。500pg/ml作為標準曲線的點濃度,標準品/樣本稀釋液(SR1)作為標準曲線的零點 (0pg/ml)。復溶過的標準品原液(2000pg/ml)未用完的應廢棄或根據需要按照一次用量分裝,并將其 貯存在-20~-80℃冰箱,具體如下圖。



           

          4. 生物素化抗體工作液:預先計算好試驗所需用量,用檢測稀釋液(SR2)將100倍抗體濃縮液稀釋成1倍應 用工作液(稀釋前充分混勻),請在30分鐘內加入到反應孔中。

           

          5. 酶結合物工作液:按每次試驗所需用量配制,用酶結合物稀釋液(SR3)將100倍濃縮酶結合物稀釋成1 倍應用工作液(稀釋前離心),請在30分鐘內使用。



          6. 洗滌方法:

          ? 自動洗板:甩盡酶標板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,注入洗滌液為 300ul/孔,注 與吸出間隔為 30 秒,洗板 5 次。

          ? 手工洗板:甩盡酶標板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,用洗瓶加入洗滌液 300ul/孔,靜止 30 秒 后甩凈酶標板孔中液體,在厚迭的吸水紙上拍干,洗板 5 次。

           

          BMP-9 Mouse ELISA Kit

          結果判斷: 
          1.用酶標儀 450 nm 波長測定 OD 值。選擇雙波長檢測,參考波長為 630 nm。如不能進行雙波長檢測,請用 450 nm 的 OD 測定值減去 630 nm 的 OD 測定值。
           2.計算標準品、樣品的平均 OD 值:每個標準品和標本的 OD 值應減去零孔的 OD 值 
          3.以標準品濃度為橫坐標,吸光度OD值為縱坐標,用軟件繪制標準曲線,樣品中含量可通過對應OD值由標準曲 線換算出相應的濃度。 
          4.若標本 OD 值高于標準曲線上限,應做適當稀釋后重新檢測,計算濃度時再乘以稀釋倍數。



          2. 靈敏度: 
          低可檢測小鼠濃度達 4pg/ml. 20 個零標準品濃度 OD 的平均值加上兩個標準差,計算相應的可檢測濃度。 
          3. 特異性: 
          不與人的 BMP-2、 BMP-3、 BMP-3b、 BMP-4 、BMP-5 、BMP-6 、BMP-8b、TGF-α、TGF-β1 小鼠 的 BMP-3b、BMPR-1A、BMPR-1B 等反應. 
          4. 重復性: 
          板內,板間變異系數<10%。 
          5. 回收率: 
          在選取的健康小鼠血漿、細胞培養上清中加入 3 個不同濃度水平的小鼠 ,計算回收率。

          6. 線性稀釋: 分別在選取的 4 份健康小鼠血漿和細胞培養上清中加入高濃度小鼠 ,在標準曲線動力學范圍內進行稀釋,評 估線性。

          小鼠骨形態發生蛋白9

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