植物脫氫酶(PDHA)活性檢測試劑盒 其它

植物脫氫酶（PDHA）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號: BC3120
規格: 50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：使用前加少量水溶解，定容至30 mL，避光、4℃保存（盡量現配現用）；

2. 試劑三：自備乙酸乙酯。提供一60mL棕色試劑瓶。

產品說明：
生物體的脫氫酶(Plant dehydrogenase , PDHA)的活性在很大程度上反映了生物體的活性狀態，能直接表示生物細胞對其基質降解能力的強弱。
受氫體2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride，即TTC）在細胞呼吸過程中接受氫以后，其還原產物三苯基甲替（Triphenyl Formazone，即TFF）呈現紅色，在波長485nm處有最大吸收峰，采用分光光度法于485nm測定其吸光值，即得植物脫氫酶活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
臺式離心機、可見分光光度計、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、冰、研缽/勻漿器、蒸餾水、乙酸乙酯（不允許快遞，請用戶自備）。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
稱取0.1g的植物組織，用雙蒸水清洗3-4次，用濾紙吸干水分，備用。
二、測定步驟

1. 可見分光光度計預熱30min以上，調節波長至485nm，乙酸乙酯調零。

2. 操作表：取5mLEP管依次加入

三、脫氫酶活力計算
酶活單位定義：在37℃時，每小時每克組織樣本使反應體系吸光值每增加0.01為一個酶活單位。
脫氫酶活性（U/g/h）=ΔA÷0.01÷T÷W=33×ΔA÷W
T：反應時間，3h；W：樣本質量，g。
注意事項：

1. 配制好的試劑一避光保存于4℃，盡量在一周內使用，若出現紅色，則不能使用。

2. 試劑三易揮發，有毒，為了您的健康，請穿實驗服，戴口罩，戴乳膠手套操作。

3. 反應完成后立即冰浴以終止反應，并去除干凈殘留的反應液。

4. 如果測定出來的吸光值較大，需把樣本適當稀釋再進行測定，注意計算公式乘以稀釋倍數。

實驗實例：

1. 稱取1g蘆薈葉片，用雙蒸水清洗3-4次，用濾紙吸干水分，按照測定步驟進行操作，測得計算ΔA=A測定-A對照=0.120-0.012=0.108，計算酶活得：

脫氫酶活性（U/g/h）=33×ΔA÷W=3.5964 U/g/h。
相關系列產品：
BC2030/BC2035 異檸檬酸裂解酶（ICL）活性檢測檢測試劑盒
BC3170/BC3175 乙酸激酶（ACK）活性檢測試劑盒
BC2010/BC2015 乙醇酸氧化酶（GO）活性檢測試劑盒

植物脫氫酶(PDHA)活性檢測試劑盒 其它 植物脫氫酶(PDHA)活性檢測試劑盒 其它