乙酸激酶(ACK)活性檢測試劑盒 其它

提取液：臨用前將試劑九加入到提取液中，并于2-8℃保存；

試劑二：臨用前每瓶加入4 mL蒸餾水，充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存；

試劑三：臨用前每瓶加入3 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；

試劑四：臨用前每瓶加入2 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；

試劑五：臨用前每支加入1 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；

試劑六：液體置于試劑瓶內EP管中。臨用前根據樣本量將試劑六、蒸餾水按43:457（V:V）的比例配制備用，現用現配；

試劑七：液體置于試劑瓶內EP管中。臨用前根據樣本量將試劑七、蒸餾水按1:9（V:V）的比例配制備用，現用現配；

試劑八：臨用前加入5 mL蒸餾水，充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存；

工作液：吸取0.3 mL 試劑二、1 mL試劑三、0.65 mL試劑四、0.2 mL試劑五、0.2 mL試劑六、0.2 mL試劑七、1 mL試劑八混勻，也可根據比例現用現配，于冰上備用。

測定過程中樣本和所有試劑在冰上放置，以免變性和失活。

比色皿中反應液的溫度必須保持37℃或25℃，取小燒杯一只裝入一定量的37℃或25℃蒸餾水，將此燒杯放入37℃或25℃水浴鍋中。在反應過程中把比色皿連同反應液放在此燒杯中。

ΔA大于1時，建議稀釋后測量，注意計算公式乘以稀釋倍數；ΔA小于0.01時，建議延長反應時間測量，注意計算公式變化。

取0.1g腎臟組織樣本，加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=A測定1-A測定2=1.893-1.147=0.746，ΔA空白=A空白1-A空白2=1.453-1.448=0.005，ΔA=ΔA測定-ΔA空白= 0.746-0.005=0.741，按樣本質量計算酶活得：

取500萬大腸桿菌加入1mL提取液超聲破碎，離心，取上清后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=A測定1-A測定2=1.476-1.448=0.028，ΔA空白=A空白1-A空白2=1.453-1.448=0.005，ΔA=ΔA測定-ΔA空白=0.028-0.005=0.023，按細菌數量計算酶活得：

Mukhopadhyay S, Hasson M S, Sanders D A. A continuous assay of acetate kinase activity: Measurement of inorganic phosphate release generated by hydroxylaminolysis of acetyl phosphate[J]. Bioorganic chemistry, 2008, 36(2): 65-69.