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品牌	SOLARBIO/索萊寶	CAS	詳詢
分子式	詳詢	純度	詳詢
分子量	詳詢	貨號	BC2030
規格	50T/48S	供貨周期	現貨
主要用途	測定意義：ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中,油料作物種子在萌	應用領域	環保,化工,生物產業,農林牧漁,綜合

異檸檬酸裂解酶（ICL）活性檢測試劑盒說明書

紫外分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2030
規格：50T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規格	保存條件
提取液	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體10 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體10 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三	粉劑×2瓶	-20℃保存
試劑四	粉劑×2瓶	-20℃保存
試劑五	液體100μL×1支	2-8℃保存
試劑六	液體13mL×1瓶	2-8℃保存
試劑七	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

提取液：臨用前將試劑七加入到提取液中，勿放于-20℃；
試劑三：臨用前取1瓶加入6.25mL蒸餾水，充分混勻待用；用不完的試劑-20℃分裝保存2周，避免反復凍融；
試劑四：臨用前取1瓶加入6.6mL蒸餾水，充分混勻待用；用不完的試劑-20℃分裝保存2周，避免反復凍融；
試劑五：使用前需先離心。根據用量按照試劑五:蒸餾水為1:8的體積比例充分混勻，現用現配；
工作液配制：按試劑一：試劑二：試劑三：試劑四：試劑五=145μL:175μL:210μL:210μL:15μL的比例將各試劑混合后備用（共755μL，1T的量），根據樣本數量現用現配。

產品說明：
ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中，油料作物種子在萌發過程中，通過乙醛酸循環及其他過程將脂肪轉變成碳水化合物。ICL是乙醛酸循環的關鍵酶之一。
ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD，NADH在340nm下有特征吸收峰，監測340nm吸光度的減小速率可間接反應ICL活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

注意事項：

測定過程中樣本和所有試劑在冰上放置，以免變性和失活。
比色皿中反應液的溫度必須保持37℃或25℃，取小燒杯一只裝入一定量的37℃或25℃蒸餾水，將此燒杯放入37℃或25℃水浴鍋中。在反應過程中把比色皿連同反應液放在此燒杯中。

相關發表文獻：
[1] Sun J, Jia H, Wang P, et al. Exogenous gibberellin weakens lipid breakdown by increasing soluble sugars levels in early germination of zanthoxylum seeds[J]. Plant science, 2019, 280: 155-163.
參考文獻：
[1] Maffei M, Bertea C M, Garneri F, et al. Effect of benzoic acid hydroxy-and methoxy-ring substituents during cucumber (Cucumis sativus L.) germination. I.: Isocitrate lyase and catalase activity[J]. Plant Science, 1999, 141(2): 139-147.
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