普魯士藍染色試劑盒（Perls stain，伊紅法）

普魯士藍染色試劑盒（Perls stain，伊紅法）

產品簡介 ：
含鐵血黃素（Hemosiderin）是一種血紅蛋白源性色素，為金黃色或棕黃色顆粒，因其含鐵、
金黃色，故稱為含鐵血黃素。當紅細胞被巨噬細胞吞噬后，在溶酶體酶的作用下，血紅蛋白被分解為不含鐵的橙色血質和含鐵的含鐵血黃素。

Perls 普魯士藍反應（Prussian blue reaction）又稱為含鐵血黃素染色，即經過和稀酸處理后可以產生藍色，常見于吞噬細胞內會間質內，主要顯示三價鐵鹽。Perls 普魯士藍是非常
經典的組織化學反應，是顯示組織內三價鐵的一種敏感、傳統優良的方法，其染色原理為：亞鐵溶液使三價鐵離子從蛋白質中被稀鹽酸分離出來，三價鐵與亞鐵反應，生成一種不溶解的藍色化合物即三價鐵的亞鐵普魯士藍，所以該反應被稱為普魯士藍反應。三價鐵的亞鐵是一種很穩定的化合物，在反應后可用紅色染色劑進行復染，如核固紅、伊紅、中性紅等。

Perls stain 常用于顯示局部組織內各種出血性病變， 常見于吞噬細胞內。 在判斷含鐵血黃素沉積時，用 Perls 反應可以得到證實，該染色方法可以很好的區分含鐵血黃素和其他色素。該染色液穩定性好、可以長期保存、不易產生沉淀、應用范圍廣、可以進行復染。普魯士藍染色試劑盒（Perls stain，伊紅法） ，其復染液采用伊紅染色液，也是常用的復染液，
該復染液染色時間較核固紅染色液要短。

產品組成 ：

主要成分 ：
試劑(A): 主要由亞鐵、稀酸等組成。
試劑(B): 主要由伊紅、防腐劑等組成。

自備材料：
1、10%的中性福爾馬林
2、系列乙醇
3、蒸餾水
4、4%的多聚甲醛

操洽步驟 （ 僅供參考 ） ：
（ 一 ） 石蠟切片染色
1、 切片脫蠟水
① 二甲苯(Ⅰ) 5～10min
② 二甲苯(Ⅱ) 5～10min
③無水乙醇(Ⅰ)（可選） 3～5min
④無水乙醇(Ⅱ)（可選） 3～5min
⑤95%的乙醇 3～5min
⑥90%的乙醇 3～5min
⑦80%的乙醇 3～5min
⑧自來水或蒸餾水沖洗(Ⅰ) 1～3min
⑨自來水或蒸餾水沖洗(Ⅱ) 1～3min
2、染色
①切片入 Perls stain（見注意事項 6）  15～30min
②蒸餾水充分沖洗 5～10min
③伊紅染色液淡染細胞核 15～30s
④自來水沖洗 1～5s
3、脫水、透明、封固
①90%乙醇 10～20s
②95%乙醇(Ⅰ) 1～2min
③95%乙醇(Ⅱ) 1～2min
④ 無水乙醇(Ⅰ) 2～3min
⑤無水乙醇(Ⅱ) 2～3min
⑥ 二甲苯(Ⅰ) 2～3min
⑦二甲苯(Ⅱ) 2～3min
⑧ 二甲苯(Ⅲ) 2～3min
⑨中性樹脂封片。
（ 二 ） 冰凍切片染色
1、 無需脫蠟，直接迅速用蒸餾水沖洗 2～3min。
2、 染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟。
（ 三 ） 細胞染色
1、4%多聚甲醛固定 10～20min。
2、自來水沖洗 2 次，每次 2min。
3、蒸餾水沖洗 2 次，每次 2min。
4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟。
染?結果 ：
含鐵血黃素或三價鐵 藍色
細胞核、其他組織 紅色
陰性對照 （ 可選 ）
取相同連續切片脫蠟水。置于 5%的草酸中，孵育 2-6h 后，經 Perla stain，需要步驟同上。
結果為陰性。

注意事項 ：
1、 切片脫蠟應盡量干凈。
2、 組織固定常采用 10%的中性福爾馬林，經普通福爾馬林長期固定后，組織會有損傷。
3、 臨用前取 A1、A2 液等量混合，即為試劑（A） ，現配現用，不可提前配制。
4、整個操作過程中容器要干凈，避免使用金屬鐵制品，洗切片和容器時以蒸餾水為宜，因普通水內含鐵質。
5、避免使用酸性固定劑，鉻酸鹽處理也會妨礙鐵的保存。
6、Perls stain 染色時，應根據樣品情況調整著色時間。
7、 所有檢查切片都應使用同一個陽性對照切片,選擇適合的對照非常重要.尸檢肺組織是一個很好的對照,包含相當數量的鐵陽性巨噬細胞(心衰細胞).
8、95%乙醇、90%乙醇應經常更換新液.
9、 冰凍切片和細胞的染色,應根據具體情況摸索實驗條件.
10、為了您的健康和安全,請穿實驗服并戴一次性手套操作.
有效期 ：12 個月

產品訂購說明：
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3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化，若有變動以訂貨當日新價格為準。 
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1、極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
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