DNA產物純化試劑盒

DNA產物純化試劑盒
貨號：D1300
規格：50T/100T
保存：常溫干燥保存，復檢期為一年。

試劑盒內容：

產品說明：
     本試劑盒采用*的離心吸附柱純化酶切、PCR 等反應液中的 DNA 片段，同時除去蛋白質、其他有機化合物、 無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質。 使用本試劑盒可回收 100bp-40kb 大小的 DNA 片段， 回收率可達 80%以上（小于 100bp 和大于 10kb 的 DNA 片段回收率為 30-50%） 。使用本試劑盒回收的 DNA 可適用于各種常規操作，包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉化等試驗。

注意事項：在使用本試劑盒前請閱讀此注意事項。
1. 本試劑盒適用于無選擇性地回收溶液中所有 DNA 片段（可去除 50bp 以下的小片段） ，如需選擇性地回收特定片段，同時去除其他不同大小片段，請選擇瓊脂糖凝膠回收試劑盒。
2. 回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關，初始量越少、洗脫體積越小，回收率越低。
3. 回收小于 100bp 和大于 10kb 的 DNA 片段時，可適當延長吸附和洗脫的時間。

操作步驟: （使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽。 ）
1、估計 PCR 反應液或酶切反應液的體積，向其中加入 5 倍體積的結合液，充分混勻。如 PCR 反應體系為 100ul,則加入 500ul 結合液。
2、將上一步所得溶液加入一個吸附柱中（吸附柱放入收集管中） ，室溫放置 2 分鐘，12,000rpm 離心 30-60 秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中。注意：吸附柱大容積為 800ul,若樣品體積大于 800ul 可分批加入。
3、向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12，000rpm 離心 30-60 秒，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
4、向吸附柱中加入 500ul 漂洗液，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
5、12000rpm 離心 2min，盡量除去漂洗液。將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，防止漂洗液中的乙醇影響后續的實驗。
6、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加適量經 65-70℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置2min，12000rpm 離心 2min 收集 DNA 溶液。

注意：

1、為了增加回收效率，可將得到的收集液重新加入吸附柱中，12000rpm 再次離心 2min。
2、洗脫緩沖液體積不應少于 30ul，體積過小影響回收效率。
3、洗脫液的 pH 值對于洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應保證其 pH 值在 7.0-8.5 之間。
7、DNA 產物-20℃保存。

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