Skim Milk脫脂奶粉 western blot

Skim Milk脫脂奶粉 western blot
貨號：D8340
規(guī)格：500G/瓶
儲存條件：室溫干燥保存
外觀（性狀）：白色或類白色粉末

說明：用于制備微生物培養(yǎng)基；配制ELISA、western等實(shí)驗(yàn)的封閉液

脫脂奶粉可用于制備微生物培養(yǎng)基；配制ELISA、western等實(shí)驗(yàn)的封閉液。western blot經(jīng)過轉(zhuǎn)印以后，膜上有了蛋白，但是還有很多地方是沒有蛋白覆蓋的，通過脫脂奶粉的蛋白孵育后，這些空白的膜都被脫脂奶粉的蛋白覆蓋了，就防止后續(xù)孵育的一抗和二抗與印跡膜的非特異結(jié)合。在科研實(shí)驗(yàn)中，脫脂奶粉也是常用的生化試劑之一。

關(guān)于脫脂奶粉和BSA作為封閉劑的一些問題

問：western blot中脫脂奶粉封閉的是哪些蛋白?原理是什么?

答：脫脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原?的蛋白去封閉膜，避免標(biāo)記抗體固定在膜上引起背景增高。

問：請問封閉液和抗體稀釋液用BSA?和脫脂奶粉有什么區(qū)別呢?

答：所謂封閉是用以減少或消除載體上的非特異性結(jié)合蛋白的分子，一般是脫脂奶粉或BSA。對WesterBlot來說兩者均為常用封閉劑。脫脂奶粉的成份遠(yuǎn)較BSA復(fù)雜，如果要做ELISA或者phage display時(shí)候，我們還是用BSA。我推測也沒有依據(jù)說脫脂奶粉就不能用，注意的是各種品牌的脫脂奶粉中殘留的脂質(zhì)量不同， 脂質(zhì)是會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的，即使是用于WesterBlot也要有所挑選。

問：封閉的時(shí)候，為什么一定要用脫脂奶粉?

答：膜上有蛋白缺損點(diǎn)，不用蛋白封蛋白缺損點(diǎn)容易出現(xiàn)非特異染色。也可用BSA封，效果并不比脫脂奶粉好。

問：western封閉為什么用脫脂牛奶，不用全脂的？

答：是因?yàn)槿绻兄镜脑挘橹瑫c奶粉中的蛋白結(jié)合，導(dǎo)致封閉的時(shí)候蛋白濃度下降，影響封閉的效果，有可能造成封閉不*，所以都會用脫脂的奶粉來做。

北京索萊寶科技有限公司為生化試劑供應(yīng)商，專業(yè)生產(chǎn)銷售生化試劑、生物試劑、細(xì)胞培養(yǎng)基、試劑盒、實(shí)驗(yàn)耗材等產(chǎn)品。脫脂奶粉為索萊寶常備貨產(chǎn)品，常用作配置封閉液，細(xì)胞培養(yǎng)等試驗(yàn)中。

相關(guān)文獻(xiàn)：

《Effect of 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 on the osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells and the underlying regulatory mechanism》 作者:Yawen Ji, Panpan Zhang ,Yixiao Xing ,Linglu Jia ,Yunpeng Zhang, Tingting Jia ,Xuan Wu ,Bin Zhao, Xin Xu 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30365053

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