2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲酸二鈉 BCA蛋白定量

2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲酸二鈉 BCA蛋白定量
貨號：PC0022
規(guī)格：1g/瓶
說明： 蛋白定量

有效期 1年

英文名稱 BCA

CAS 979-88-4

分子式 C20H10N2Na2O4· xH2O

分子量 388.28

儲存條件 2-8℃

純度 Purity≥98%

外觀（性狀） 白色淡黃色粉末

單位 瓶

蛋白定量

產(chǎn)品簡介：
堿性條件下，蛋白將Cu2+還原為Cu+， Cu+與BCA試劑形成紫藍(lán)色的絡(luò)合物，測定其在562nm處的吸收值，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測結(jié)果，但受螯合劑(EDTA, EGTA)、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類的影響。實(shí)驗(yàn)中，若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
操作說明：
一. 微孔酶標(biāo)儀法
1. 配制工作液：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時可能會有渾濁，但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取10μL BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋100μL（樣品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/mL。將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中，加PBS補(bǔ)足20μL。
3. 將樣品作適當(dāng)稀釋（多做幾個梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋），加20μL到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時誤差偏大，標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確，所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。
4. 各孔加入200μL BCA工作液，37℃放置15-30分鐘。用酶標(biāo)儀測定A562nm，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時，應(yīng)注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結(jié)果。
二. 分光光度計法 如沒有酶標(biāo)儀，可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。 步驟如下：
1. 配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時可能會有渾濁，但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取100μL BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋1mL（樣品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/mL。
3. 取八支（或者更多）5mL離心管，標(biāo)上號，按下表加入試劑。

參考文獻(xiàn)：

《Endometrial mesenchymal stem cells isolated from menstrual blood repaired epirubicin-induced damage to human ovarian granulosa cells by inhibiting the expression of Gadd45b in cell cycle pathway》 作者:Zhongrui Yan?, Fengyi Guo?, Qing Yuan?, Yu Shao?, Yedan Zhang?, Huiyan Wang?, Shaohua Hao and Xue Du authorView ORCID ID profile 期刊:Stem Cell Research & Therapy 影響因子:4.963 PMID:30606243

《Isoquercitrin, a flavonoid glucoside, exerts a positive effect on osteogenesis in vitro and in vivo》 作者:JingLiabXuxiaWangacYingziWangabChengyanLudDehuaZhengabJunZhangab 期刊:Chemico-Biological Interactions 影響因子:3.296 PMID:30365939

2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲酸二鈉 BCA蛋白定量