低熔點瓊脂糖 DNA電泳

低熔點瓊脂糖 DNA電泳

貨號：A8350
規格：2.5g/5g/100g

• 英文名稱：Agarose(Low melting gel)

• CAS：9012-36-6

• 分子式：C10H15N3O3

• 儲存條件：避光常溫

• 外觀（性狀）：粉末

• 單位：瓶

    DNA、脂蛋白和免疫電泳用；由于其低熔點的特性特別適用于DNA等回收。

    A low-melting agarose that melts between 62-68 °C and remains liquid for several hours at 37°C. Ideal for purification of macromolecules from agarose slices and for in-gel enzymatic manipulations.

    DNase (P/F)

    EEO (-Mr)    0.12

    Gel Strength (1.0%) (g/cm2)   250

    Gelling Range (1.0%) (°C)   24 - 29

    Melting Range (°C)  62 - 68

    Moisture (%)   < 10

    Protease (P/F)

    RNase (P/F)

    Sulfate (%)   0.1

    正確的加熱方式對瓊脂糖的充分溶解和凝結關重要，在此，我們提供以下幾點作為正確制備瓊脂糖凝膠的操作參考。

?  瓊脂糖加熱溶解所需時間短。

?  瓊脂糖在TAE或者TBE緩沖液中不溶解，加熱時，瓊脂糖顆粒水化形成溶液，水化是時間依賴的，不同的瓊脂糖水化點不同。瓊脂糖純度高，超微顆粒，非常適合作為電泳實驗載體。對比于其他的瓊脂糖，瓊脂糖水化速度快，使用者無需煮沸過長時間，否則易導致膠液濃稠，不利于混勻，凝膠后易破損。

瓊脂糖凝膠制備

    用1×TBE溶液配制1%濃度瓊脂糖凝膠

    1.用于制備膠液的錐形瓶體積應為膠液體積的2-4倍，緩慢向緩沖液中加入瓊脂糖，邊加邊攪拌，防止瓊脂糖聚集。記錄瓶體和溶液總重量。

    2.微波爐高火加熱30s，根據配制的溶液體積調整加熱時間。加熱時間與微波爐、瓶體大小和瓊脂糖濃度有關。

    3.搖勻瓊脂糖溶液。

    4.再次高火加熱30s，搖勻瓊脂糖溶液。

    5.將溶液再次放回微波爐，高火加熱沸騰（大約10-35s）。接觸移動時瓊脂糖膠液可能會劇烈沸騰，小心操作，避免燙傷。從微波爐拿出后，室溫冷卻1-2min，輕輕搖晃使液體里的氣泡溢出。

    6.重新放回微波爐，高火加熱，使之沸騰約15s，觀察瓊脂糖的溶解狀態，如果仍有顆粒存在，重復該步驟直所有晶體全部溶解。

    7.待瓊脂糖*溶解成液體，重新稱量總重量，計算蒸發液體量，用水補齊原始重量，搖勻液體。

    8.建議膠液冷卻50-55℃時灌膠，有利于凝膠孔徑均勻*，不于損傷制膠儀。灌膠前輕輕搖晃瓊脂糖溶液，釋放膠液中殘存的氣泡。

    9.向制膠槽中灌膠，一般膠的厚度3-5mm，灌膠后盡量排除梳孔之間或底部的氣泡。

    10.在室溫放置（30-45min）使膠充分凝結。

如果要制備不同濃度和不同體積的凝膠，請注意以下兩點：

    1.在凝膠溶液煮沸前少進行2次搖勻。

    2.膠液沸騰后，每隔10-15s觀察一次膠液溶解程度（間隔時間取決于膠液濃度和體積）。

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 相關文獻：

《The Synergistic Antibacterial Properties of Glycinin Basic Peptide against Bacteria via Membrane Damage and Inactivation of Enzymes》 作者:Hou Qi NingYing Qiu LiEmail authorZhao Sheng WangEmail authorHai Zhen Mo 期刊:Food Biophysics 影響因子:2.051 PMID:
《Role of large plasmid DNA in salt tolerance of a novel strain》 作者:Uddin, M., Jiti, Z., Saleh, M., Ekram, A., Sikdar, B., & Zaman, S 期刊:International journal of biological 影響因子:4.057 PMID:
 

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