重組牛腸激酶

重組腸激酶

規(guī)格：100u 

活性≥10u/ul

特異性高，純度高

供應(yīng)商：北京索萊寶

重組腸激酶簡介

     索萊寶腸激酶是一種高純度的重組牛腸激酶。該酶經(jīng)HPLC純化，純度高，特異性高，并且不含其他蛋白酶。腸激酶（EC 3.4.21.9）是一個特定的蛋白酶，它可以切割前面含有四個天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點(diǎn)：天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸-賴氨酸。腸激酶可去除位于蛋白質(zhì)N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合標(biāo)簽。

重組腸激酶優(yōu)勢

高純度  高特異性

1）特定的蛋白酶，切割前面含有四個天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點(diǎn)：天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸- 天冬氨酸- 賴氨酸(DDDDK)

2）不含其他蛋白酶,無非特異性切割

酶切條件：

按照酶活性定義，重組EK酶切條件舉例：25mM Tris-HCl 8.0體系中：

融合蛋白濃度     0.1-1mg/ml （蛋白總量50-100μg）

重組EK用量      1-2U

溫度      25℃

隔夜酶切，或*酶切需12h-16h。

常見影響腸激酶活性的因素

在＞200mM 咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果受影響。可參照以下推薦方法進(jìn)行酶切：

1）為獲得理想酶切結(jié)果，請將樣品透析到25mM Tris-HCl 8.0緩沖液中，再進(jìn)行酶切。

2）若不便透析，可將樣品稀釋，咪唑含量在100mM以下，NaCl濃度在50mM以下，甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切，酶的用量與蛋白的比例不變（即1U酶切50μg蛋白）。

3）如果樣品溶液中含有上述成分中的一種或多種，且不便去除，此時適當(dāng)增加酶量或延長酶切時間，也可達(dá)到較好酶切效果。

重組腸激酶用途

用于去除位于蛋白質(zhì)N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合標(biāo)簽

重組腸激酶特性

來源 重組大腸桿菌

分子量 理論MW：25,850DA

活性定義

1U定義為在25℃，12h-16h之內(nèi)，將50ug保存于25mM Tris-HCl 8.0緩沖液中的融合蛋白切割達(dá)95%所需的酶量。

儲存 -20℃

穩(wěn)定性 可以在常溫下運(yùn)輸，在25℃可穩(wěn)定保存一周，酶液可以反復(fù)凍融數(shù)次，對酶活無影響

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