基因組提取試劑盒 DNA病毒基因組提取試劑盒

基因組提取試劑盒 DNA病毒基因組提取試劑盒
貨號：D2400
規格：50T、100T
保存：室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復檢期 12 個月，2℃-8℃保存時間更長 。

產品說明：
    本試劑盒適合于從血清、細胞上清、淋巴液中提取 DNA 病毒基因組，不適合于 RNA 病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組 DNA 可用于各種常規操作，包括酶切、PCR、文庫構建、Southern 雜交等實驗。

產品包裝：

操作步驟：
    使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
    1、 取病毒上清液 0.5ml，12000rpm 離心 5min，盡量吸盡上清使用，棄去沉淀。
    2、 向病毒上清中加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K， 充分混勻， 65℃消化 10-20min， 期間可顛倒離心管混勻數次。
    3、 向管中加入 500ul 結合液，充分混勻。再向管中加入 400ul 無水乙醇，充分混勻，此時可能會出現絮狀沉淀，不影響DNA 的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中，靜置 2min。 （吸附柱的大容積為 750ul，可分兩次加入。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心。 ）
    4、 12000rpm 離心 2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
    5、 向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
    6、 向吸附柱中加入 500ul 漂洗液，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
    7、 12000rpm 離心 2min，將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續的實驗如酶切、PCR 等。
    8、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加 50ul-100ul 經 65℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置 5min，12000rpm 離心 1min。
    9、 離心所得洗脫液再加入吸附柱中， 室溫放置 2min， 12000rpm 離心 2min， 即可得到高質量的病毒基因組 DNA。

注意事項:

1、試劑盒拆封后，蛋白酶K需放置-20℃保存。
2、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
3、若結合液中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解再使用，不影響效果。
4、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul，體積過小會影響回收效率。洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調此范圍)，pH 值低于7.0會降低洗脫效率。DNA產物應保存在-20℃，以防DNA降解。
5、DNA濃度及純度檢測：得到的基因組DNA片段的大小與病毒的保存條件和種類等因素有關。D 260 值為 1.0 相當于大約 50 ug/ml雙鏈DNA、40 ug/ml單鏈DNA。OD 260 /OD 280 比值應為 1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。
6、如果病毒含量過低，后提取的基因組DAN電泳可能無法檢測到，但PCR等其他實驗還會有結果。

 

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基因組提取試劑盒 DNA病毒基因組提取試劑盒訂購說明：

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運輸說明：

1、極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
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