基因組提取試劑盒通用基因組DNA提取試劑盒

基因組提取試劑盒通用基因組DNA提取試劑盒
貨號：D2100
規格：50T、100T
保存：室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復檢期 12 個月，2℃-8℃保存時間更長。開封后請將 RNase A，蛋白酶 K于-20℃保存。

產品說明：
    本試劑盒為通用型，適合于從土壤，糞便，昆蟲，以及其他樣本中提取基因組 DNA。對細菌，真菌，昆蟲等樣本都具有很好的裂解效果，大限度的保留了生物 DNA 的多態性。使用本試劑盒提取的 DNA 產量大、完整性好，可直接用于各種常規操作，包括酶切、PCR 、文庫構建、Southern 雜交等實驗。

產品包裝：

操作步驟：
    使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1、樣品的處理：
    1）土壤：稱取 0.1-0.3g (根據干濕)土壤，放入研缽中，倒入適量的液氮，立即研磨，重復 3 次，使土壤顆粒研成粉末，加 500ul 溶液 A，振蕩*懸浮。
    2）糞便：稱取 0.1-0.3g (根據干濕) 糞便，加 500ul 溶液 A，振蕩*懸浮。
    3）昆蟲：稱取 0.1-0.3g 昆蟲，倒入適量的液氮，立即研磨，重復 3 次，使昆蟲研成粉末，加 500ul 溶液A，振蕩*懸浮。
    4）未知樣品，如為細未狀，可直接稱取 0.1-0.3g(根據干濕)加 500ul 溶液 A，如為塊狀，可 0.1-0.3g 用液氮研磨成粉未，再加 500ul 溶液 A，振蕩*懸浮。2、向懸浮液中加入 20ul 10mg/ml 的 RNase A，55℃放置 10min。3、加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K，充分混勻，55℃水浴消化，30min。消化期間可顛倒離心管混勻數次，12000轉離心 10min。將上清轉移到一個新的離心管中。如有沉淀，可再次離心。
4、加入 500ul 溶液 B，充分混勻。如出現白色沉淀，于 55℃放置 5min，沉淀即會消失，不影響后續實驗。如溶液未變清亮，說明樣品消化不*，可能導致提取的 DNA 量少及不純，還有可能導致上柱后堵柱子，請增加消化時間。
5、加入 500ul 無水乙醇，充分混勻，此時可能會出現絮狀沉淀，不影響 DNA 的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中，放置 2min (分兩次加入，每次 700ul)。
6、12000rpm 離心 2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
7、向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
8、向吸附柱中加入 500ul 漂洗液，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中
9、12000rpm 離心 2min，將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續的實驗如酶切、PCR 等。
10、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加 50-200ul 經 65℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm 離心 2min。
11、離心所得洗脫液再加入吸附柱中，室溫放置 2min，12000rpm 離心 2min，即可得到高質量的基因組 DNA.。

注意事項:

1、由于樣品不同，終提取的 DNA 含量和純度也有所不同，一般來說，如果所提取 DNA 用電泳的方法檢測不到，PCR 會有結果，樣品盡可能的新鮮。否則會導致提取的 DNA 片段較小且提取量也下降。
2、若試劑盒中的溶液出現沉淀，可在 65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響提取效果。
3、如果樣品消化不*，后面的離心步驟中可能會出現堵柱子的情況，可適當延長離心時間。
4、洗脫緩沖液的體積好不少于 50ul，體積過小會影響回收效率；洗脫液的 pH 值對洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應保證其 pH 值在 8.0 左右(可用 NaOH 將水的 pH 值調此范圍)，pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率；DNA 產物應保存在-20℃，以防 DNA 降解。
5、DNA濃度及純度檢測（濃度較高時）：得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。 回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。 DNA應在OD 260 處有顯著吸收峰， OD 260 值為 1 相當于大約 50μg/ml雙鏈DNA、 40μg/ml單鏈DNA。 OD 260 /OD 280 比值應為 1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。

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基因組提取試劑盒通用基因組DNA提取試劑盒訂購說明：

1、絕大部分產品備有現貨，一般情況下都能訂貨當日發貨。 
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運輸說明：

1、極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
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