油紅O染色步驟有哪些

油紅O染色液主要由油紅O異丙醇飽和液組成，利用染料易溶于脂質(zhì)的性質(zhì)證明組織脂質(zhì)含量的多少。適用于細(xì)胞學(xué)與組織學(xué)研究的切片觀察.但滲透慢,不能長(zhǎng)期保存;冰凍切片附貼于載玻片后，立即放入恒冷箱中的固定液固定1分鐘后即可染色。染色后脂滴呈橘紅色。下面來(lái)了解一下油紅O染色步驟有哪些。
油紅O染色步驟
試劑:
0.5%的油紅O溶液
配方(100ml)： 油 紅O ： 1.5g
70%乙醇 ： 50ml
丙酮 ： 50ml
需要的其他試劑：異丙醇、乙醇、丙酮、蘇木素（hematoxylin）
油紅O染色步驟:
1．將冰凍切片(厚度為4-8um)常溫干燥15-20min.
2．100%異丙醇孵育5分鐘（避免把水帶入油紅O）。
3．0.5%的油紅O溶液孵育7-8分鐘（在60 oC烤箱）
4．85%異丙醇溶液洗3分鐘
5．雙脫水洗。
6．蘇木素染1-1.5min。
7．雙脫水洗。
8．封片劑封片
結(jié)果: 脂質(zhì)呈紅色或者橘黃色
細(xì)胞核呈淡藍(lán)色
油紅O染色步驟注意事項(xiàng)：
1 由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑，所以一般用冰凍切片染色來(lái)顯示。
2 作脂肪染色的冰凍切片不能太薄，過(guò)薄的切片常會(huì)使脂質(zhì)丟失。
3 蘇木素復(fù)染時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)。
4 染色結(jié)果不能長(zhǎng)期保存，應(yīng)盡快觀察。

以上便是油紅O染色步驟，油紅O染色常用作染脂肪。脂類(lèi)染色法常用以證明脂肪變性，脂肪栓子以及腫瘤的鑒別。脂類(lèi)染色使用廣泛的染料是蘇丹染料，常用的有蘇丹Ⅲ，蘇丹Ⅳ，蘇丹黑及油紅O等。脂肪被染色，實(shí)際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現(xiàn)染料的顏色。脂類(lèi)染色，用冰凍或石蠟切片，以水溶性封固劑封固，如甘油明膠和阿拉伯糖膠等。