歡迎光臨北京索萊寶科技有限公司網站!
          銷售咨詢熱線:
          18101056239
          產品目錄
          您的位置: 網站首頁 > 技術文章 > IPTG配制的方法及使用說明

          IPTG配制的方法及使用說明

          發布日期: 2016-04-26
          瀏覽人氣: 9425

          IPTG是一種作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定,因此被實驗室廣泛應用。IPTG溶液的配制很簡單:在8ml蒸餾水中溶解2g IPTG后,用蒸餾水定容10ml,用0.22μm濾器過濾除菌,分裝成1ml小份貯存于-20℃。

          IPTG的使用方法:

          先把IPTG配制成24mg/ml(100mM)的水溶液,并進行過濾除菌后保存。然后在100ml的瓊脂培養基中,加入100μl的上述溶液、200μl的X-Gal(20?mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100μl的Amp(100mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養基。當DNA片段插入pUC系列載體(或其他帶有lacZ、Amp基因載體),然后轉化lacZ缺失細胞中后,涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養基,可根據長出菌體的藍白色,而方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。

          選用IPTG作誘導物的原因

          能誘導酶的合成,但又不被分解的分子,稱為安慰誘導物(gratuitousinducer)。?由于乳糖雖可誘導酶的合成,但又隨之分解,產生很多復雜的動力學問題,因此人們常用安慰誘導物來進行各種實驗。X-gal(5-溴-4-錄-3-吲哚-β-半乳糖苷)也是一種人工化學合成的半乳糖苷,可被β-半乳糖苷酶水解產生蘭色化合物,因此可以用作β-半乳糖苷酶活性的指示劑。IPTG和X-gal都被廣泛應用在分子生物學和基因工程的工作中。

          某些誘導物與自然的β-半乳糖苷酶相似,且不能?被酶分解,比如異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,(isopropylthiogalactoside,IPTG)。不被細菌分不被細菌分解性質穩定,解性質穩定,它的濃度在實驗中不會改變。復雜的動力學問題,便于研究。IPTG能在缺乏lacY基因下而有效地被運送。半乳糖苷鍵中用硫代替了氧,失去了水解活性,半乳糖苷鍵中用硫代替了氧失去了水解活性,但硫代半乳糖苷和同源的氧代化合物與酶位點的親和力相同,雖不為β-半乳糖苷酶所識的親和力相同,IPTG雖不為半乳糖苷酶所識雖不為但它是lac基因簇十分有效的誘導物

          基因簇十分有效的誘導物。但它是基因簇十分有效的誘導物。

          IPTG是β–半乳糖苷酶的活性誘導物質。基于這個特性,當pUC系列的載體DNA(或其他帶有lacZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時。

          分享到:
          五月天婷婷精品免费视频| 日韩免费人妻AV无码专区蜜桃| 麻豆aⅴ精品无码一区二区 | 亚洲国产精品福利片在线观看| 亚洲国产综合精品一区在线播放| 亚洲免费日韩无码系列| 另类ts人妖精品影院| 久久国产亚洲精品| 久久九九兔免费精品6| 99国产精品免费视频观看| 国产成人精品高清在线观看93| 69精品人人人人| 国内精品久久久久久久久| 精品国产免费一区二区三区| 青春草无码精品视频在线观| 亚洲国产日韩女人aaaaaa毛片在线 | 亚洲国产另类久久久精品黑人 | 国语自产偷拍精品视频偷拍| 精品国产毛片一区二区无码| 国产高清精品一区| 国产69精品久久久久9999| 一本大道无码人妻精品专区 | 国产精品视频二区不卡| 亚洲精品白浆高清久久久久久| 中文字幕一区二区三区日韩精品| 三级精品在线观看| 91久久精品91久久性色| 欧亚精品卡一卡二卡三 | 精品久久久久久久| 国内精品伊人久久久久| 国产精品禁18久久久夂久| 乱人伦精品视频在线观看| 国产精品va久久久久久久| 国产成人精品大尺度在线观看| 亚洲精品无码专区2| 精品人妻无码专区中文字幕| 久久精品国产清自在天天线| AV无码精品一区二区三区宅噜噜| 国内精品视频在线观看| 777午夜精品久久av蜜臀| 久久精品成人免费观看|