DAB顯色試劑盒（20×）說明書

DAB顯色試劑盒（20×）說明書

貨號(hào)：DA1010

規(guī)格：        

保存：   -20℃避光密閉保存，一年有效，避免反復(fù)凍融；短期可2-8℃保存。產(chǎn)品簡(jiǎn)介：   二氨基聯(lián)苯胺（Diaminobenzidine,DAB）是過氧化物酶（POD）的顯色底物，DAB顯色液主要用于免疫過氧化物酶法，適用于辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記的免疫印記或免疫組化反應(yīng)。過氧化物酶催化底物發(fā)生反應(yīng)，于反應(yīng)部位產(chǎn)生棕色沉淀物，免疫印記可直接在膜上顯示條帶；免疫組化標(biāo)本顯色時(shí)間一般為室溫5-20分鐘，隨后在顯微鏡下觀察顯色情況，顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時(shí)脫水封固，其終產(chǎn)物可直接在光鏡下觀察，也可經(jīng)OsO4處理后，增加反應(yīng)產(chǎn)物的電子密度，用于電鏡觀察。操作說明：

• 對(duì)于組織切片或蛋白質(zhì)印記膜，在與辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后，用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5次，每次3-5分鐘。
• 取900μl PBS（或雙蒸水），加入50μl 溶液A，50μl 溶液B混合均勻，即配成DAB工作液。

如需要更大體積工作液，可按比例放大。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配，配好后避光保存，1小時(shí)內(nèi)使用，過期后請(qǐng)將剩余的液體廢棄。

• 向組織切片或印記膜上加入適量DAB工作液，確保能充分覆蓋樣品。
• 室溫避光孵育3-10 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間，避免光照，直顯色預(yù)期深淺。
• 去除DAB染色工作液，用蒸餾水洗滌2-3次即可終止顯色反應(yīng)。
• 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品，顯色反應(yīng)終止后，可對(duì)其進(jìn)行其他染料復(fù)染。對(duì)于膜，顯色反應(yīng)終止后，可以室溫晾干避光保存。

注意事項(xiàng)：

• DAB溶液應(yīng)低溫密封保存。如有結(jié)晶析出，應(yīng)確保結(jié)晶*溶解再行使用。
• 顯色工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，新鮮配制的工作液應(yīng)為無色或淺棕色，如顏色過深，請(qǐng)勿使用。
• 顯色時(shí)間嚴(yán)格控制，根據(jù)情況調(diào)整，以免顯色過度。固相膜顯色數(shù)小時(shí)后即會(huì)褪色，不能*存在。
• DAB為可疑致癌物，請(qǐng)采取必要的防范措施。操作時(shí)應(yīng)戴手套，盡量避免與皮膚接觸，用后及時(shí)*沖洗，接觸DAB的實(shí)驗(yàn)用品好經(jīng)洗液浸泡24h后使用。

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