尼龍膜、PVDF膜、NC膜區(qū)別

轉(zhuǎn)印膜：用于蛋白質(zhì)和核酸的轉(zhuǎn)移和檢驗(yàn)過程的微孔膜。

Southern blot：又稱Southern印跡雜交，是研究DNA圖譜的基本技術(shù)。

Northern blot：又稱Northern印跡雜交，是檢測(cè)RNA的基本技術(shù)。

Western blot：又稱Western印跡雜交，是蛋白質(zhì)檢測(cè)分析的基本技術(shù)。

轉(zhuǎn)印膜在蛋白質(zhì)和核酸的轉(zhuǎn)移和檢測(cè)過程中應(yīng)用廣泛，不同的轉(zhuǎn)印膜規(guī)格和參數(shù)不同，選擇正確、均一穩(wěn)定的轉(zhuǎn)印膜對(duì)達(dá)到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果起到關(guān)鍵性的作用。

常用的三種轉(zhuǎn)印膜：硝酸纖維素膜（NC膜）、帶正電的尼龍膜（N66膜）、聚偏氟乙烯膜（PVDF膜）

轉(zhuǎn)印膜區(qū)別

• 結(jié)合能力：帶正電的尼龍膜>PVDF膜>硝酸纖維素膜。

尼龍膜結(jié)合DNA和RNA能力可達(dá)480－600μg/cm2，可結(jié)合短10bp的核酸片段；硝酸纖維素膜結(jié)合DNA和RNA能力可達(dá)80－100μg/cm2，對(duì)于200bp的核酸片段結(jié)合能力不強(qiáng)；PVDF膜結(jié)合DNA和RNA能力可達(dá)125－300μg/cm2。

• 結(jié)合穩(wěn)定性

更好的機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)耐受性使PVDF膜在各種染色應(yīng)用和多重免疫檢測(cè)中成為理想選擇；而且單個(gè)凝膠的泳道復(fù)本可用于多種目的，特別是需要做N端蛋白測(cè)序，在相當(dāng)“嚴(yán)酷”的清洗條件下，當(dāng)尼龍膜或者硝酸纖維素膜已經(jīng)降解的情況下PVDF膜依然保持本色，所以PVDF也是要做蛋白測(cè)序的*選擇，但不適合熒光。PVDF膜特別注意的是需要100%甲醇預(yù)處理(不超過15秒)再用緩沖液平衡，才能用。

• 溫度耐受性：

尼龍膜經(jīng)烘烤或紫外線照射后，核酸中的部分嘧啶堿基可與膜上的正電荷結(jié)合；硝酸纖維素膜依靠疏水性相互作用結(jié)合DNA，結(jié)合不牢固；PVDF膜結(jié)合牢固，耐高溫，特別適合于蛋白印跡。

• 機(jī)械強(qiáng)度：

硝酸纖維素膜較脆，易破碎，不能重復(fù)使用；尼龍膜和PVDF膜機(jī)械強(qiáng)度較高，可重復(fù)使用。

• 價(jià)格比較：PVDF膜>硝酸纖維素膜>尼龍膜

• 可重復(fù)性：

尼龍膜可反復(fù)用于分子雜交，雜交后，探針分子可經(jīng)堿變性被洗脫下來；硝酸纖維素膜不能重復(fù)使用；PVDF膜可以重復(fù)使用。

• 操作簡便性

NC膜的使用很簡便，比如不需要甲醛預(yù)處理，只要在無離子水面浸潤排出膜內(nèi)氣泡，再在電泳緩沖液中平衡幾分鐘就可以了；比如NC膜很容易封閉，也不需要特別嚴(yán)謹(jǐn)?shù)那逑礂l件。轉(zhuǎn)移到NC膜上的蛋白在合適的條件下可以穩(wěn)定保存很長時(shí)間，不過要注意的是純的硝纖膜在比較脆，又容易卷，操作要小心，不適合用于需要多次重復(fù)清洗的用途。

• 背景：NC膜和PVDF背景較低；尼龍膜背景高

注:

1、Biodyne B膜：通過高密度的季銨組來增加孔的表面。我們所生產(chǎn)的尼龍膜具有高的靈敏度，適用于各種核酸應(yīng)用。

BiodyneC膜：可以通過孔表面的羧基組耦合反應(yīng)來導(dǎo)出。

2、醋酸纖維素膜

由于醋酸纖維素薄膜對(duì)各種蛋白質(zhì)（包括血清白蛋白，溶菌酶及核糖核酸酶）都幾乎*不吸附，因此無拖尾現(xiàn)象；電泳后區(qū)帶界限清晰；通電時(shí)間較短（二十分鐘一小時(shí)）；對(duì)染料也沒有吸附，因此不結(jié)合的染料能*洗掉，無樣品處幾乎*無色。由于醋酸纖維素薄膜吸水量較低，因此必需在密閉的容器中進(jìn)行電泳，并使用較低有電流避免蒸發(fā)。同時(shí)其對(duì)蛋白的結(jié)合能力較其它轉(zhuǎn)移膜弱些。

轉(zhuǎn)印膜區(qū)別

轉(zhuǎn)印膜區(qū)別

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