血清的常見問題

血清是細胞培養中重要的元素之一。因此，上海科興特別整理了一些實驗室里常會遇到的問題，供大家參考：

1、保存血清好的方法是什么？

上海公司建議血清應保存在-5℃-2O℃。但是，若存放于4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。反復凍融會對血清的品質造成不良影響。

2、如何解凍血清才不會使產品質量受損?

上海公司建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規則地搖晃均勻。

3、血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現，該如何處理?

由于GIBCO血清在過濾之前，沒有經過預老化(pre-aged)處理，所以在解凍過程（包括沒有*解凍）或儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如凝集素、纖維蛋白原和玻連蛋白等）可能會聚集成團，形成絮狀沉淀或外觀混濁；在運輸過程中，由于時間較長，所以往往有少許解凍，因此也可能稍有沉淀，但這些都不影響血清性能。

若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝無菌離心管內，以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾膜。

4、何謂熱滅活?

一般是以56℃，30分鐘來處理已解凍的血清，因為此加熱步驟，可以使補體去活化，而補體所參與的反應有:溶細胞，平滑肌的收縮，肥大細胞和血小板組胺的釋放，增強吞噬作用，淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。

5、有必要做熱滅活嗎?

實驗顯示，經過正確處理的熱滅活血清，對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚通常因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低。而經過熱滅活的血清，沉淀物的形成會顯著增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。

因此我們建議您，若非必須，您可以不做熱滅活處理血清。這樣，不僅節省您寶貴的時間，更確保血清的質量。只在做免疫學研究或培養干細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，才推薦做熱滅活。我公司也有已經熱滅活的血清可供選擇。

6、如何減少沉淀物的產生?

上海科興建議您在使用血清的時候，注意下列的操作:

解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-20℃4℃ 室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃ 37℃)，實驗顯示非常容易產生沉淀物。

解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生

請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質量。

血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，則毋須做此步驟。

若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。