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          ELISA相關(guān)問(wèn)題(二)

          發(fā)布日期: 2025-08-05
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          5. Q:明確標(biāo)明種屬的試劑盒可以用來(lái)檢測(cè)其他種屬的樣本么?

          AELISA試劑盒嚴(yán)格區(qū)分種屬,一般不推薦跨種屬檢測(cè),不同種屬的同一個(gè)指標(biāo)同源性相差可能會(huì)很大,抗體的特異性要求比較高,不同種屬樣本與抗體結(jié)合能力會(huì)有很大差別。

          6. QELISA試劑盒只能檢測(cè)血清、血清、細(xì)胞上清液么?

          A:通常我們可用于ELISA檢測(cè)的樣本是有多種類(lèi)型的,可以是血清、血漿、細(xì)胞上清等常規(guī)樣品,也可以是尿液、細(xì)組織勻漿液、細(xì)胞裂解液等,不同類(lèi)型的檢測(cè)樣本前期的處理方法是不一樣的。樣品中含有影響生物活性的物質(zhì)會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

          7. Q:試劑盒中的酶標(biāo)板是包被好的么?

          A:劑盒中提供的包被板已經(jīng)包被過(guò)檢測(cè)抗體,可以直接使用。進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)僅限使用本試劑盒中的組分,不能使用別的板條進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。96孔酶標(biāo)板是可拆的,每條8孔。可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)取出部分板條使用,剩余的酶標(biāo)板放回含有干燥劑的鋁箔袋中,4度保存,不會(huì)影響酶標(biāo)板性能。若拆封的酶標(biāo)板沒(méi)有正確儲(chǔ)存,導(dǎo)致板子受潮,可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。用過(guò)的板條不可重復(fù)使用。

          8. Q:試劑盒在使用前要室溫放置30min ,目的是什么?

          AELISA試劑盒對(duì)于溫度的要求比較嚴(yán)格,溫度是ELISA結(jié)合反應(yīng)的重要影響因素,這樣做主要是為了使試劑溫度一致,在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度,以滿(mǎn)足測(cè)定要求。

          9. Q:試劑盒保存溫度是多少度?為什么說(shuō)明書(shū)上寫(xiě)的標(biāo)準(zhǔn)品是-20度,標(biāo)簽上寫(xiě)的是4度呢?

          A:試劑盒保存溫度是4度,說(shuō)明書(shū)中只有標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)注的保存溫度是-20度,由于標(biāo)準(zhǔn)品是凍干的重組蛋白,-20度保存會(huì)延長(zhǎng)重組蛋白的保存期限。試劑盒的有效期是6個(gè)月,凍干的重組蛋白能夠在4度保存6個(gè)月,但是如果有條件或者想更長(zhǎng)時(shí)間保存,還是建議能夠?qū)?biāo)準(zhǔn)品-20度保存。

          10. Q:樣本收集后不能及時(shí)檢測(cè)低溫保存可以放多久?

          A:樣本收集后24之內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),放在4度冰箱即可。如果樣本收集后不能立即檢測(cè),需將樣本置于低溫冰箱中,樣本3個(gè)月內(nèi)檢測(cè)可于-20度保存,若存放時(shí)間更久,需要用-80度冰箱保存。

          11. Q:樣品反復(fù)凍融影響大么?

          A:樣品反復(fù)凍融對(duì)蛋白影響非常大,能導(dǎo)致蛋白降解,非常不建議反復(fù)凍融樣品。一般蛋白含量豐富的樣本例如血清/血漿反復(fù)凍融1-2次,對(duì)于檢測(cè)結(jié)果影響不是非常大,但是其他類(lèi)型的樣本,例如細(xì)胞上清液、肺泡灌洗液,反復(fù)凍融會(huì)使蛋白降解嚴(yán)重,對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響非常大。

          12. Q:生物素化抗體和酶結(jié)合物,稀釋后沒(méi)用完,還可以再用嗎?

          A:稀釋后的生物素化抗體和酶結(jié)合物建議在當(dāng)天用完,放置時(shí)間太長(zhǎng)可能會(huì)影響其活性。可根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)所需用量進(jìn)行配制,不建議過(guò)量配制。


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