了解8周標(biāo)準(zhǔn)兔多抗制備佐劑工作原理

用途： 

   通過(guò) 8 周 3 針的標(biāo)準(zhǔn)免疫程序制備兔子多克隆抗體， ELISA 滴度 （Cutoff 值為 0.1000）可達(dá)到 1:10000-1:1000000。

備注：

   常溫運(yùn)輸，2-8oC 保存，無(wú)菌取用，有效期 12 個(gè)月。（切勿凍存！）

使用方法：

    1. 用生理鹽水將抗原稀釋到 2  倍最終濃度（按每針次 100μl  用量配制）。備注：推薦使用的抗原用量為（1）免疫原性較弱的亞單位蛋白抗原每針次 20-50μg；（2）免疫原性較強(qiáng)的滅活全病毒或全細(xì)菌以及病毒樣顆粒抗原每針次 5-10μg。

    2. 充分混勻佐劑，無(wú)菌條件下取出所需用量（按每針次 100μl ）與抗原按體積比 1:1  迅速混勻。備注：本佐劑產(chǎn)生沉淀屬正常現(xiàn)象，與抗原混合操作越快越好。

    3. 通過(guò)后腿小腿肌肉注射免疫兔子，每只兔子注射 200μl 。備注：（1）本佐劑與抗原混合后產(chǎn)生沉淀屬正常現(xiàn)象， 抽入針管前應(yīng)充分混勻， 抽入針管后應(yīng)盡快注射；（2）客戶也可根據(jù)各自的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣選擇皮下注射或皮內(nèi)注射進(jìn)行免疫。

    4. 第 21  天和第 42  天按同樣方式分別加強(qiáng)免疫 1  針。備注：每次佐劑和抗原現(xiàn)配現(xiàn)用，注射部位同初次免疫。

    5. 第 52-56  天采微量血進(jìn)行 ELISA  測(cè)定，抗體滴度應(yīng)在 1:10000-1:1000000  范圍內(nèi)，隨后即可大量采血.

與常規(guī)使用的弗氏佐劑相比，SoFastAntibody免疫佐劑具有免疫周期短、針次少、無(wú)需乳化、抗原用量低、抗體滴度高、抗體親合力高、易獲得構(gòu)象型表位的抗體等多方面優(yōu)點(diǎn)，詳述如下：

    1.SoFastAntibody只需兩針免疫，無(wú)論是用于單克隆還是多克隆抗體制備，與弗氏佐劑相比可減少免疫針次。

    2.SoFastAntibody通過(guò)減少免疫針次和降低每針次抗原用量，從而可大大節(jié)省總抗原用量。推薦使用的抗原用量為（1）免疫原性較弱的亞單位蛋白抗原每針次5-50μg（通常為小鼠5-20μg，兔子20-50μg）；（2）免疫原性較強(qiáng)的滅活全病毒或全細(xì)菌以及病毒樣顆粒抗原每針次1-10μg（通常為小鼠1-5μg ，兔子5-10μg）。

    3.SoFastAntibody抗體產(chǎn)生快，抗體滴度高，抗體親合力高。以標(biāo)準(zhǔn)免疫程序?yàn)槔瑹o(wú)論是用于單克隆還是多克隆抗體制備，只需要在三周內(nèi)進(jìn)行兩針免疫，通常在第五周即可獲得ELISA滴度（Cutoff值為0.1000）高達(dá)1:10000-1:10000000的高親合力抗體水平。

    4.SoFastAntibody不破壞抗原天然構(gòu)象，從而易于篩選獲得針對(duì)構(gòu)象型抗原表位的單克隆抗體，這是弗氏佐劑所不具備的一個(gè)重要特點(diǎn)。

    5.SoFastAntibody是一類水溶性佐劑，使用時(shí)不需要弗氏佐劑的復(fù)雜乳化過(guò)程，抗原和佐劑只需簡(jiǎn)單混合即可用于免疫動(dòng)物。

    6.SoFastAntibody使用肌肉免疫途徑，與常規(guī)小鼠單克隆抗體制備過(guò)程中使用足墊免疫或脾內(nèi)免疫相比，極大地方便了使用。

    7.SoFastAntibody的一個(gè)重要用途是可方便地用于制備小鼠多克隆抗體。常規(guī)多克隆抗體制備多使用兔子，不但免疫針次多、抗原用量大和抗體產(chǎn)生慢，而且由于技術(shù)要求較高而往往需要委托專門單位制備。使用SoFastAntibody免疫佐劑，任何實(shí)驗(yàn)動(dòng)物人員均可方便快速地制備小鼠多克隆抗體，標(biāo)準(zhǔn)免疫程序只需要簡(jiǎn)單地免疫5只小鼠，即可在五周后獲得1ml高質(zhì)量的小鼠多克隆抗體。（強(qiáng)烈推薦使用本佐劑制備小鼠多克隆抗體，1ml高質(zhì)量的小鼠多克隆抗體足以滿足絕大多數(shù)用戶的實(shí)驗(yàn)需求，包括用于酶聯(lián)免疫、免疫印跡、流式細(xì)胞、免疫組化和免疫沉淀等）。

    8.SoFastAntibody建議常溫運(yùn)輸，2~8oC保存，無(wú)菌取用，有效期12個(gè)月。