來了解活性氧檢測原理

 活性氧檢測試劑盒（Reactive Oxygen Species Assay Kit）是一種利用熒光探針 DCFH-DA進行活性氧檢測的試劑盒。DCFH-DA 本身沒有熒光，可以自由穿過細胞膜，進入細胞內后，可以被細胞內的酯酶水解生成DCFH。而 DCFH 不能通透細胞膜，從而使探針很容易被裝載到細胞內。細胞內的活性氧可以氧化無熒光的DCFH 生成有熒光的DCF 。檢測DCF 的熒光就可以知道細胞內活性氧的水平。

對于原位裝載探針的樣品可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察，或收集細胞后用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測。對于收集細胞后裝載探針的樣品可以用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測，也可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察。

注意事項： 

1. 探針裝載后，一定要洗凈殘余的未進入細胞內的探針，否則會導致背景較高。

2. 探針裝載完畢并洗凈殘余探針后，可以進行激發(fā)波長的掃描和發(fā)射波長的掃描，以確認探針的裝載情況是否良好。DCF 的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜請參考上圖。

3. 盡量縮短探針裝載后到測定所用的時間（刺激時間除外），以減少各種可能的誤差。

4.  為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。