透射電鏡服務(wù)及取材注意事項-細(xì)菌和細(xì)胞

細(xì)胞樣本

● 觀察細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞密度不要超過70%，棄去培養(yǎng)基，加入恢復(fù)至室溫電鏡固定液（貨號：P1126）。

● 常溫避光固定5min左右，用細(xì)胞刮刀大約斜45°沿一個方向輕輕刮下細(xì)胞，切記不要反復(fù)刮，避免細(xì)胞刮破。

● 使用巴氏吸管把細(xì)胞液吸入離心管內(nèi)，放入離心機(jī)，1500-3000rpm，離心3-5min，細(xì)胞團(tuán)要有綠豆大小。

● 棄掉上清固定液后加新的電鏡固定液，電鏡固定液需要緩慢加入，不要將細(xì)胞吹散。若將細(xì)胞吹散，再次離心，保持細(xì)胞成團(tuán)狀。

● 4度避光固定24h，4度保存。冰袋運(yùn)輸，在運(yùn)輸過程中氣泡膜包裹。樣品不要和冰袋直接接觸，切勿冷凍結(jié)冰。

離心收集細(xì)胞要肉眼可見細(xì)胞沉淀有綠豆大小，棄培養(yǎng)基后加電鏡固定液，4度避光固定24h，冰袋運(yùn)輸，在運(yùn)輸過程中氣泡膜包裹。樣品不要和冰袋直接接觸，切勿冷凍結(jié)冰。

注意：觀察細(xì)胞凋亡，需把培養(yǎng)液中的細(xì)胞也離心收集后固定。

細(xì)菌樣本

與培養(yǎng)基一起挑下細(xì)菌放于恢復(fù)至室溫的電鏡固定液內(nèi)，4度避光固定24h，4度保存，冰袋運(yùn)輸，在運(yùn)輸過程中氣泡膜包裹。樣品不要和冰袋直接接觸，切勿冷凍結(jié)冰。

離心收集細(xì)菌要肉眼可見細(xì)菌沉淀綠豆大小，棄培養(yǎng)基后加恢復(fù)至室溫電鏡固定液，4度避光固定24h，4度保存，冰袋運(yùn)輸，在運(yùn)輸過程中氣泡膜包裹。樣品不要和冰袋直接接觸，切勿冷凍結(jié)冰。