核酸提取是濃度越高越好嗎？

發(fā)布日期： 2022-12-20

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　　分子診斷是以核酸作為檢測對象，主要應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室各類疾病的診斷中，如腫瘤、感染、遺傳等，而核酸提取是分子診斷實(shí)驗(yàn)的“開始”。

　　幾乎所有實(shí)驗(yàn)均是以核酸提取為基礎(chǔ)，無論后續(xù)的克隆、PCR、qPCR、建庫、測序等都需要核酸提取以后才能順利進(jìn)行。核酸提取純化質(zhì)量是保證核酸檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的前提，也是分子診斷行業(yè)發(fā)展的前提。

　　核酸提取又叫核酸提取純化，簡單點(diǎn)就是裂解+純化。裂解就是通過溫度以及試劑將樣本中的核酸游離在裂解液體系的過程。純化就是使核酸與裂解體系中的其他雜質(zhì)成分比如蛋白質(zhì)，鹽等徹底分離的過程。

　　核酸的檢測方法：檢測核酸質(zhì)量的方法有很多，實(shí)驗(yàn)室常見的方法就是凝膠電泳、紫外分光光度計(jì)、PCR擴(kuò)增。

　　PCR與電泳到底誰強(qiáng)？

　　眾所周知，土壤核酸提取很容易失敗，原因在于土壤通常是富含腐殖酸以及腐殖酸類似物。核酸提取的過程中，如果雜質(zhì)去除的不干凈就會直接影響下游的PCR實(shí)驗(yàn)。

　　曾有人說，你看我土壤提取的濃度多高，但是一做PCR擴(kuò)增就發(fā)現(xiàn)電泳一片“漆黑”，新手總是百思不得其解。

　　其實(shí)很容易理解，因?yàn)楹怂崽崛『蟮碾娪緢D只能輔助我們判斷提取的核酸的濃度，并不能成為檢測核酸質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)。要想判斷核酸提取的成功，做PCR擴(kuò)增是直接、簡單的方式。

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