細(xì)胞檢測(cè)試劑如何進(jìn)行收集、保存及處理

發(fā)布日期： 2021-11-16

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　　細(xì)胞檢測(cè)試劑被應(yīng)用于定量活細(xì)胞的的細(xì)胞數(shù)量，其中基于熒光素酶（Luciferase）的冷光細(xì)胞活力檢測(cè)系統(tǒng)以其高靈敏度、高穩(wěn)定性被廣泛用于各種活細(xì)胞的檢測(cè)及藥物篩選。

　　檢測(cè)試劑采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，往預(yù)先包被SRB捕獲抗體的包被微孔中，依次加入檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并清洗。

　　用底物TMB著色，TMB會(huì)在過(guò)氧化物酶的作用下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的SRB呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品濃度。

　　細(xì)胞檢測(cè)試劑的樣品收集、保存方法及處理辦法：

　　1、血清：采用的是不含內(nèi)毒素和熱原的試管，操作過(guò)程中要注意不能受到任何細(xì)胞刺激，收集血液后，檢測(cè)試劑盒使用離心機(jī)3000轉(zhuǎn)功率10分鐘將血清和紅細(xì)胞小心且迅速地分離。

　　2、血漿：EDTA、肝素抗凝和檸檬酸鹽。使用離心機(jī)3000轉(zhuǎn)功率工作30分鐘后取上清。

　　3、細(xì)胞上清液：使用離心機(jī)3000轉(zhuǎn)功率工作10分鐘去除聚合物和顆粒。

　　4、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。使用離心機(jī)3000轉(zhuǎn)功率工作10分鐘取上清。

　　5、保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分開(kāi)保存，存放于-20℃的環(huán)境之中，避免反復(fù)凍融，在室溫下進(jìn)行解凍樣品。

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