操作需謹慎，WB實驗時需要注意這些！

發布日期： 2021-10-11

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　　WB實驗，蛋白質印跡又稱免疫印跡，是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。

　　實驗原理：一個基因表達結果是產生相應的蛋白質(或酶)。因此，檢測蛋白質是測定基因表達的主要標志，檢測蛋白質的方法很多，除ELISA法外，也可用與檢測DNA和RNA相類似的吸印方法。

　　而樣本制備是WB實驗的開始也是重要的一步，它的操作雖然并不復雜，卻有很多需要注意的細節。

　　根據實驗需要的目標蛋白的不同，大致可以分為三種：總蛋白、膜蛋白和核蛋白?？偟鞍滋崛☆櫭剂x就是把組織或細胞內所有的蛋白全都提取出來；膜蛋白、核蛋白提取簡單來說就是把細胞膜、細胞核上的蛋白質提取出來。

　　不同部位的蛋白要能夠進行提取分離，需要用到不同的提取試劑，看起來十分麻煩。其中在應用裂解液進行裂解的時候，除了釋放出目標蛋白，也同時釋放出一些酶，這些酶可能會降解我們的目標蛋白，所以需要對這部分酶進行降解。

　　WB實驗中添加合適的蛋白酶抑制劑（abs9161）或磷酸酶抑制劑（abs9162），全程低溫操作，提前預冷PBS（abs961）、裂解液甚至槍頭等，從收集細胞開始一直到煮樣的全過程都應該盡可能的保持在冰上操作。

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操作需謹慎，WB實驗時需要注意這些！