在使用熒光蛋白上樣緩沖液需要關(guān)注哪些細節(jié)？

  熒光蛋白上樣緩沖液在進行蛋白樣品變性處理的同時對蛋白進行預(yù)染色，電泳結(jié)束后即可直接使用凝膠成像儀的紫外光源或者LED燈觀察電泳結(jié)果。免去了染色法染色脫色的過程，不增加任何其它操作步驟，不使用任何有機溶劑，保護環(huán)境,實驗室再無藍色污漬，電泳結(jié)束即可觀察實驗結(jié)果，節(jié)省了實驗時間。

  熒光蛋白上樣緩沖液在使用時應(yīng)注意以下幾點：

  1. 請勿使用該上樣緩沖液處理預(yù)染的或預(yù)處理的蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)。這些產(chǎn)品與不兼容。
  2. 靈敏度影響因素：高pH（大于7）不會影響染色，低pH則會降低染色的效率，如果樣品的pH低于5，建議將pH調(diào)整7以上。
  3. 不適合在如下SDS-PAGE實驗中使用：切割蛋白條帶用以測序、質(zhì)譜分析或抗體制備。

  4. 建議-20℃避光保存，如果室溫放置2-3周，則可添加新的DTT，蛋白條帶會重新變得清晰和明亮。添加DTT的終濃度不要超過20 mM。也可以添加其他還原劑TCEP，效果也很好。